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1α,25-二羟维生素D3对早期角膜移植小鼠Th17细胞的免疫调控作用
目的:观察在同种异体角膜移植的小鼠模型中,1α,25-二羟维生素D3对Th17细胞及其相关细胞因子的影响。方法:C57BL/6小鼠作为受体,BALB/c小鼠作为供体,建立小鼠穿透性角膜移植术模型。术后隔日对角膜移植小鼠腹腔注射1.0μg 1α,25二羟维生素D3(维生素D3干预组),模型组和正常对照组腹腔注射等量大豆油。在裂隙灯活组织镜下观察角膜移植物的透明情况,评估排斥反应的发生情况,并取角膜移植物做病理学检测。采用实时荧光定量PCR检测脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平,Western blotting分析外周血中RORγt及IL-17的蛋白含量,流式细胞术检测外周血IL-17和IFN-γ细胞因子的表达情况。结果:1α,25-二羟维生素D3显著地抑制了同种异体角膜移植排斥反应,同时减少了角膜移植物的炎性渗出。应用1α,25-二羟维生素D3治疗后,小鼠脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平降低;外周血中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平被下调。结论:1α,25-二羟维生素D3抑制小鼠同种异体角膜排斥反应的作用与IL-17及相关细胞因子RORγt细胞调节密切相关。吴静,张瑾,侯光辉,崔裕波,王超,陈剑 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
Foxp3/Treg与RORγt/Th17细胞失衡在慢性阻塞性肺疾病大鼠中的作用
目的:观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠叉头状/翅膀状螺旋转录因子p3(Foxp3)、调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17特异性转录因子T孤独核受体(RORγt)的表达。方法将20只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和COPD模型组,每组10只。采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入的方法建立COPD模型;正常对照组不予任何处理。28 d后测定两组大鼠肺功能;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL-6、IL-10)水平;流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达;蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织Foxp3、RORγt、IL-17蛋白表达。结果光镜下观察模型大鼠肺泡腔及肺间质内大量炎性细胞浸润,病变区肺泡结构破坏,肺泡壁变薄、甚至断裂融合成大疱,部分肺泡腔内有不同程度的出血。与正常对照组比较,模型组用力肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、FEV0.3/FVC、用力呼气峰值流速(PEF)明显下降〔FVC(mL):8.04±2.03比9.97±2.14,FEV0.3(mL):6.16±2.23比8.84±2.12,FEV0.3/FVC:0.70±0.09比0.85±0.11,PEF(mL/s):33.56±4.76比40.14±5.64,P<0.05或P<0.01〕;血清IL-6明显升高(ng/L:93.17±20.96比76.28±13.24, P<0.05),IL-10明显降低(ng/L:78.62±15.17比104.34±19.46,P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+Treg表达明显降低〔(2.75±0.83)%比(4.16±1.14)%,P<0.01〕;肺组织Foxp3蛋白表达明显降低(灰度值:0.38±0.15比0.63±0.11,P<0.01),RORγt、IL-17蛋白表达明显升高〔RORγt(灰度值):0.96±0.23比0.47±0.11,IL-17(灰度值):1.02±0.24比0.34±0.08,均P<0.01〕。相关性分析显示,肺功能参数FEV0.3与Foxp3呈正相关(r=0.585,P<0.05);FEV0.3/FVC与IL-6、RORγt呈负相关(r=-0.655、r=-0.607,均P<0.05);PEF与Treg呈正相关(r=0.573,P<0.05),与IL-17呈负相关(r=-0.198,P<0.05)。IL-6与Foxp3呈负相关(r=-0.603, P<0.05),与RORγt呈正相关(r=0.588,P<0.05);IL-10与Treg呈正相关(r=0.573,P<0.05);Treg与Foxp3呈正相关(r=0.607,P<0.05),与IL-17呈负相关(r=-0.569,P<0.05);Foxp3与RORγt呈负相关(r=-0.591,P<0.05);RORγt与IL-17呈正相关(r=0.578,P<0.05)。结论 COPD肺功能降低、炎症反应升高与Foxp3/Treg、RORγt/Th17表达失衡有关。王成阳,刘向国,彭青和,方莉,王传博,李泽庚 - 中华危重病急救医学文章来源: 万方数据 -
白细胞介素17在狼疮性肾炎小鼠中的表达及抗白细胞介素17抗体的干预作用
目的:探讨白细胞介素17(IL-17)在狼疮性肾炎(LN)小鼠中的表达及抗IL-17抗体的干预作用.方法:11周龄的雌性MRL/lpr小鼠36只随机分为实验组和干预组,另有同龄雌性昆明小鼠18只为对照组.干预组每只小鼠腹腔注射抗小鼠IL-17多克隆抗体20 μg,每2周1次,至实验观察点结束.各组分别于第1次给药后的24 h、14 d及28 d处死6只小鼠.光镜下观察肾脏病理情况,ELISA法检测小鼠血清IL-17的含量,免疫组化法检测肾组织IL-17的表达水平.结果:MRL/lpr小鼠肾小球系膜细胞及基质弥漫增生,肾小管上皮细胞颗粒及空泡变性,灶状萎缩,肾间质淋巴及单核细胞浸润伴纤维化;而干预组肾脏病理改变较实验组为轻.MRL/lpr小鼠的血清IL-17含量在实验组各时点均显著高于对照组(P<0.05),而在干预组各时点均显著低于实验组(P<0.05).IL-17在实验组小鼠肾小管上皮细胞中的表达明显增强,在各时点均显著高于对照组(P<0.05);在干预组,IL-17在各时点的表达均显著低于实验组(P<0.05).结论:IL-17在MRL/ lpr小鼠血清与肾组织中的表达显著增加,而抗IL-17抗体可通过抑制IL-17的表达而抑制LN的炎症免疫反应,减轻肾脏病理损害.徐靓,张慧涛,郑晶,贾宁,林琳,林宇静,李玲玲,周文英,张桦 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
白细胞介素-17、白细胞介素-4及γ干扰素在实验性自身免疫性葡萄膜炎中的表达
目的 观察白细胞介素(IL)-17、白细胞介素(IL)-4及γ干扰素(IFN-γ)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)中的表达.方法 采用健康雌性C57BL/6小鼠建立EAU模型.建模前及建模后7、14、21、28 d,取小鼠眼球作石蜡病理切片,光学显微镜观察小鼠视网膜结构变化;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中IL-17、IL-4、IFN-γ含量;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测小鼠视网膜组织中IL-17、IL-4、IFN-γ的mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹法检测小鼠视网膜组织中IL-17、IL-4、IFN-γ的蛋白表达.结果 建模后14d,光学显微镜观察发现,葡萄膜组织结构破坏,大量炎症细胞浸润.小鼠血清中IFN-γ含量,脾及视网膜组织中IFN-γ mRNA和蛋白表达均于建模后7d达到高峰;小鼠血清中IL-4、IL-17含量,脾及视网膜组织中IL-4、IL-17 mRNA和蛋白表达均于建模后14 d达到高峰.小鼠血清中IL-17含量,脾及视网膜组织中IL-17 mRNA和蛋白表达升高程度均较IFN-γ、IL-4更为显著.建模前与建模后7、14、21 d小鼠血清中IL-17、IL-4、IFN-γ含量比较,差异均有统计学意义(F=1 817.346、268.600、164.621,P<0.05);建模前与建模后28d小鼠血清中IL-17、IL-4、IFN-γ含量比较,差异无统计学意义(P>0.05).建模前与建模后7、14、21d小鼠脾(F=312.67、114.250、216.220)及视网膜(F=271.504、85.370、80.722)组织中IL-17、IL-4、IFN-γ蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);建模前与建模后28 d小鼠脾及视网膜组织中IL-17、IL-4、IFN-γ蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 IL-17、IL-4、IFN-γ在EAU中均明显表达,共同参与了EAU疾病的过程.侯彬,沈琳,王红,陈海婷,赵萌 - 中华眼底病杂志文章来源: 万方数据 -
5型腺病毒载体对人T淋巴细胞的转染及细胞毒性分析
目的:利用5型腺病毒载体转染人T淋巴细胞,对其转染T淋巴细胞的效率以及细胞毒性进行分析.方法:选取T淋巴瘤Jurkat细胞及原代T细胞,腺病毒按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为20、50、100、200和400对其转染,转染48 h后利用流式细胞术检测转染效率;选取腺病毒转染后的不同时点,利用碘化丙啶染色法分析转染对于细胞周期的影响;利用Annexin V/7-AAD染色法分析转染诱导细胞凋亡情况;利用台盼蓝染色计数法分析转染对活细胞数目的影响.结果:5型腺病毒载体转染T淋巴瘤的效率最高,转染效率随着MOI值的增大而增加;CD8+T细胞和CD4+T细胞的转染效率大致相同,T细胞经刺激活化后,CD8+T细胞的转染效率下降;病毒转染未导致明显细胞凋亡;病毒转染对细胞周期与活细胞数目没有显著影响.结论:5型腺病毒载体转染T细胞呈现较低细胞毒性.张文峰,张琼宇,邵红伟,吴凤麟,王腾,黄树林 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
慢病毒载体介导的RNA干扰及其在T淋巴细胞的应用
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是普遍存在于生物体中的一种序列特异性的基因表达调控方式,它是由小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)介导的特异性降解mRNA的过程[1].T淋巴细胞是处于非分裂期的细胞,在移植物抗宿主病等疾病中起到重要作用,是基因治疗中常用的靶细胞.但在RNAi技术中,T淋巴细胞基因转导效率低而影杜晶晶,孙轶华 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
原发皮肤外周T细胞淋巴瘤1例
患者男性,68岁.因左小腿瘤块半年入院.半年前发现左小腿长出一肿块,并逐渐增大,就诊时肿块直径已达6cm,肿块固定,无活动度.患者一般状况良好,左小腿肿块皮肤及其周围皮肤有瘙痒感,患者无发热,无浅表淋巴结肿大和肝脾肿大等其他特殊症状.追问病史,患者3年前发现胸壁多发不规则紫红色皮损,缓慢逐渐增大,现体检发现最大皮损大小5 cm*4 cm,皮损稍高出皮肤表面,皮肤无破溃.向春香,涂频,余波,何燕,夏春,石群立 - 临床与实验病理学杂志文章来源: 万方数据 -
脓毒症患者外周血微小RNA-155和调节性T细胞表达的关系
目的 探讨微小RNA-155(miR-155)对脓毒症患者外周血CD4 +CD25+调节性T细胞(Treg)的调节作用,从而了解miR-155在脓毒症发病中的作用机制.方法 采用回顾性研究方法,选取江苏大学第四附属医院急诊科和重症监护病房(ICU)脓毒症患者60例(轻度20例、中度20例、重度20例)及20例健康对照者.于确诊后2h内取静脉血,采用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+ Treg细胞表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-155、Foxp3mRNA表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)水平.结果 脓毒症患者外周血Treg表达率和miR-155、Foxp3mRNA表达以及IL-10水平均明显高于健康对照组[Treg:(2.89±1.13)%比(2.32±0.91)%,t=10.540,P=0.002; miR-155:1.19±0.48比0.80±0.33,t=8.605,P=0.006; Foxp3 mRNA:0.18±0.08比0.13±0.03,t=6.862,P=0.008; IL-10(ng/L):56.89±17.28比33.24±11.93,t=12.742,P=0.001];并且随着急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分增加而升高,重度组[Treg:(3.05±1.21)%,miR-155:1.36±0.79,Foxp3 mRNA:0.21±0.10,IL-10(ng/L):62.82±21.38]、中度组[Treg:(2.86±0.88)%,miR-155:1.25±0.56,Foxp3 mRNA:0.17±0.08,IL-10(ng/L):56.38±19.65]、轻度组[Treg:(2.61±0.87)%,miR-155:0.94±0.52,Foxp3 mRNA:0.15±0.05,IL-10(ng/L):45.43±14.40]之间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.01).死亡组各指标明显高于存活组[Treg:(3.46±1.53)%比(2.85±1.03)%,t=14.250,P=0.005; miR-155:1.41±0.85比1.16±0.76,t=11.875,P=0.006;Foxp3mRNA:0.24±0.11比0.17±0.09,t=8.795,P=0.001; IL-10 (ng/L):65.47±23.58比51.70±16.86,t=16.313,P=0.001].miR-155表达与Treg和Foxp3mRNA表达水平均呈正相关(r1=0.635、P=0.007,r2=0.671、P2=0.005).结论 miR-155参与对Treg细胞增殖的调节,在脓毒症免疫失衡机制中发挥一定的作用.汪勤,赵春辉,蔡琴,朱华英 - 中华危重病急救医学文章来源: 万方数据 -
骨髓间充质干细胞体外诱导免疫调节机制的探讨
目的:观察骨髓间充质干细胞(BM MSCs)对体外活化T细胞的免疫调节作用.方法:提取Wistar大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养.实验分3组,3个时间点:分别为0、24、48 h脾淋巴细胞/BM MSCs+刀豆蛋白A(ConA)(实验组),脾淋巴细胞+ConA(对照组),单纯淋巴细胞组(空白组).MTT检测T淋巴细胞活性,ELISA检测细胞因子TNF-α、IL-10及TGF-β水平,流式检测Foxp3+调节性T细胞表达率.结果:(1)与对照组相比,实验组24、48 h在2个时间点T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05);(2)与对照组相比,实验组TNF-α在2个时间点有显著降低(P<0.05),实验组IL-10、TGF-β表达水平有显著升高(P<0.05);(3)实验组Foxp3+T调节细胞表达率高于对照组;(4)随着时间延长,空白组及对照组T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05),实验组T淋巴细胞活性随时间延长差异无统计学意义.结论:BM MSCs可以抑制T淋巴细胞活化,并通过减少炎症因子TNF-α的释放抑制免疫应答.另外,BM MSCs可通过自分泌及诱导T调节细胞产生并分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β下调免疫反应,产生免疫耐受.杜杰静,宋红丽,沈中阳,郭瑞雪,吴本娟,付楠楠 - 天津医科大学学报文章来源: 万方数据 -
手足口病并发脑炎患儿免疫功能及与病情严重程度的关系研究
目的:探讨手足口病并发脑炎患儿免疫功能及与病情严重程度的关系.方法:收集2010年6月至2013年6月我院收治的180例手足口病患儿的临床资料,根据病情严重程度分为重症组(并发脑炎组)72例和轻症组(无脑炎组)108例,以120例同期同龄健康体检儿童为对照组.采用流式细胞仪进行T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平的测定,同时采用免疫比浊法进行免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平的检测.结果:180例手足口病患儿CD3+、CD4+及CD8+水平及免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平均低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重症组患儿CD3+、CD4+及CD8+水平及免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平均低于轻症组,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:手足口病患儿特别是合并有脑炎的重症手足口病患儿存在明显的免疫功能低下及免疫调节紊乱,因此在手足口病患儿的治疗过程中,应注意增强免疫支持治疗.胡小平,陈杰 - 儿科药学杂志文章来源: 万方数据

