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重症腹腔感染大鼠肠系膜淋巴液成分分析
目的 通过分析重症腹腔感染大鼠肠系膜淋巴液的成分,探讨重症腹腔感染时肠淋巴途径的作用.方法 将24只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为模型组与假手术组,每组12只.采用腹腔注射人工胃液联合大肠杆菌的方法制备重症腹腔感染模型.收集各组大鼠制模后4h的肠系膜淋巴液,进行白细胞计数及分类;检测肠淋巴液中内毒素、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷氨酰胺转移酶(GST)、蛋白及各细胞因子的浓度.结果 重症腹腔感染大鼠肠淋巴液中中性粒细胞比例较假手术组明显升高(0.167±0.004比0.061±0.006,t=33.520,P<0.001),而巨噬细胞(0.009±0.001比0.020±0.004,t=-6.677,P<0.001)及淋巴细胞比例(0.824±0.005比0.921±0.004,t=-31.471,P<0.001)较假手术组明显降低.与假手术组比较,模型组大鼠肠淋巴液中内毒素水平(kEU/L:0.346±0.022比0.186±0.001,t=18.103,P<0.001)、AKP[U(金氏):13.97±5.55比3.76±0.18,t=4.503,P=0.006]、LDH(U/L:2 827.45±1 940.32比712.68±14.09,t=2.670,P=0.044)、CK(kU/L:2.19±1.21比0.70±0.01,t=3.035,P=0.029)、GST活性(kU/L:12.33±6.53比1.36±0.39,t=4.105,P=0.009)均明显升高,肠淋巴液中蛋白(g/L:4.40±0.48比2.84±0.16,t=6.882,P-0.001)、肿瘤坏死因子-α[TNF-α(ng/L):499.39±76.36比180.90±70.98,t=7.483,P<0.001]、白细胞介素-6[IL-6(μg/L):13.74±0.78比-0.07±0.07,t=52.972,P=0.001]、细胞间黏附分子-1[ICAM-1(ng/L):2 754.19±221.48比1 362.85±393.43,t=6.891,P<0.001]、单核细胞趋化蛋白-1[MCP-1(μg/L):28.23±1.77比24.87±1.15,t=3.561,P=0.007]及高迁移率族蛋白B1[HMGB1 (ng/L):1 392.78±572.42比564.17±21.32,t=3.543,P=0.016]水平均明显升高.结论 肠淋巴途径可能是重症腹腔感染导致远隔器官损伤的早期途径.张艳敏,崔乃强,张淑坤 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
5-脂氧合酶对缺氧诱导的视网膜新生血管形成的抑制作用
目的 观察5-脂氧合酶(5-LOX)对缺氧诱导的视网膜新生血管形成的抑制作用,探讨视网膜新生血管形成的可能机制.方法 鼠龄为7d的C57BL/6J幼鼠随机分为正常组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、大剂量干预组、小剂量干预组、干预对照组.各组分别为12只.除正常组外,其余各组小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)%的氧箱内饲养5d后转移至正常环境中饲养5d,建立OIR模型.12~17日龄时,大剂量干预组、小剂量干预组小鼠腹腔每天分别注射100、50 mg/kg 5-LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸;干预对照组小鼠腹腔每天注射等体积1%二甲基亚砜;OIR模型组小鼠出氧箱后不作任何处理.石蜡切片苏木精-伊红染色并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核,CD34标记鼠新生血管内皮细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT PCR)检测视网膜中5-LOX、血管内皮生长因子(VEGF)-a、VEGF受体-2(VEGFR-2)的mRNA含量.蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测视网膜中5-LOX、VEGF-a、VEGFR-2、细胞外磷酸化信号调节蛋白激酶(P-ERK) 1/2的蛋白表达含量.结果 不同剂量干预组突破内界膜的视网膜新生血管内皮细胞核数较OIR模型组、干预对照组明显减少,差异有统计学意义(F=73.390,P<0.05).RT-PCR、Western blot检测结果显示,不同剂量干预组小鼠视网膜5-LOX、VEGF-a、VEGFR-2的mRNA和蛋白表达均较OIR模型组、干预对照组减少,差异有统计学意义(F=92.668,P<0.05);大剂量干预、小剂量干预组之间VEGFR-2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(F=2.118,P>0.05);5-LOX、VEGF-a、P-ERK 1/2相对蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=86.490、165.128、139.424,P<0.05).结论 缺氧可以诱导视网膜中5-LOX的高表达;5 LOX选择性抑制可以降低其表达并减少缺氧诱导的新生血管形成.贺涛,江黎,程谷萌,邢怡桥 - 中华眼底病杂志文章来源： 万方数据 -
变形链球菌pacA和gtfB-eat与etxB嵌合表达质粒的构建及表达
目的:构建含变形链球菌表面蛋白A区编码基因(pacA)、葡糖基转移酶催化区编码基因(gtfB-cat)及霍乱毒素B亚单位编码基因(ctxB)的嵌合表达质粒并表达目的蛋白.方法:将目的基因pacA、gtfB-cat、ctxB克隆至原核克隆载体pET32-a(+)构建嵌合质粒pET-pacA-cat-ctxB,将其转入表达宿主菌E.coliBL21(DE3),并测量其表达情况.结果:构建的重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,证实目的基因均正确插入到载体pET'32a(+)中,插入的相位正确,未改变目的基因的阅读框架,经诱导后表达目的蛋白,分子质量大小与预期-致.结论:成功构建了嵌合质粒pET-pa-cA-cat-ctxB,且它们均在原核细胞内获得正确表达.张剑,赵秀,杨德琴,顾瑜,吴家媛,刘建国 - 天津医药文章来源： 万方数据
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