科创中国

目的:比较荧光定量PCR(FQ-PCR)和酶联免疫吸附技术(ELISA)在手足口病肠道病毒快速检测中的应用价值.方法:选取疑似手足口病患儿200例,采集咽拭子、粪便、疱疹液标本232份,进行FQ-PCR检测,同时采用ELISA进行平行检测,比较两者的阳性检出率、灵敏度与特异性以及检测窗口期.结果:应用FQ-PCR方法,咽拭子、粪便、疱疹液中EV71、CoxA16、通用型肠道病毒核酸RNA的总阳性检出率分别为84.83%、81.82%、85.71%,差异无统计学意义(F=0.79,P>0.05).FQ-PCR方法咽拭子、粪便、疱疹液阳性检出率均高于ELISA法对血液的阳性检出率(χ2=3.17~5.11,P<0.05).FQ-PCR、ELISA诊断灵敏度分别为97.03%、87.50%(χ2=3.98,P<0.05),诊断特异性分别为97.22%、88.68%(χ2=3.85,P<0.05).在EV71、CoxA16及通用型肠道病毒方面,FQ-PCR的检测窗口期均早于ELISA,差异有统计学意义(P<0.05).结论:FQ-PCR在手足口病肠道病毒快速检测方面优于ELISA,具有更高的阳性检出率、灵敏度与特异性,以及更早的检测窗口期,对手足口病的早期诊断具有较高的临床指导意义和推广应用价值.

目的传统赭曲霉毒素A(OTA)竞争抗原毒性强、成本高、制备难度大.将OTA模拟表位展示于丝状噬菌体pⅧ表面,获得无毒、易于制备的OTA竞争抗原替代物.方法构建带有OTA模拟表位的重组噬菌粒pC89-COTA,为了提高OTA模拟表位与抗体的结合率,在OTA模拟表位序列5'端引入了肠激酶酶切位点.噬菌粒转化进大肠杆菌XL1-blue后再经野生KM13噬菌体感染,获得带有OTA模拟表位的重组噬菌体.用该噬菌体代替竞争抗原建立OTA的无毒ELISA分析方法.结果成功表达出带有OTA模拟表位的重组噬菌体,经肠激酶酶切的OTA模拟表位噬菌体与OTA抗体的结合效率显著高于未酶切的噬菌体.利用酶切后的噬菌体建立OTA的无毒ELISA分析方法,其最低检出限为100pg/ml,线性范围为250pg/ml~1000pg/ml.进行加标回收实验,回收率为99.8%~112.3%,相对标准偏差为8.19%~11.64%,测试16份市售样品,阳性率为31.25%.结论成功表达了OTA模拟表位噬菌体,建立了OTA的无毒ELISA检测方法.

目的 探讨血小板衍生生长因子( PDGF)在急性白血病中的表达及意义.方法 急性白血病患者(实验组)42例,依据法美英(FAB)诊断标准分为急性淋巴细胞白血病(ALL)组和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组;同时,根据有无髓外浸润再分为髓外浸润组和非髓外浸润组,又根据诊断与治疗分别分为复发和初诊、部分缓解和完全缓解亚组.正常对照者(对照组20例).应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组研究对象的血清PDGF水平.结果 实验组血清PDGF(406.77±119.35)ng/L明显高于对照组(128.59±15.23)ng/L(P<0.01);ALL血清PDGF (503.32±89.78) ng/L高于ANLL(334.36±81.67) ng/L(P<0.05);但在ALL和ANLL各亚型之间PDGF水平差异无统计学意义;髓外浸润组PDGF(437.11±100.99)ng/L比非髓外浸润组(330.93±131.99)ng/L表达高(P<0.05);复发患者PDGF(442.20±91.26)ng/L、初诊患者(447.70±100.46)ng/L表达均高于部分缓解(280.07±34.64) ng/L、完全缓解组患者(253.27±91.53) ng/L,(P<0.05);急性白血病组患者治疗前血清中PDGF(406.77±119.35) ng/L明显高于治疗后(181.25±52.69)ng/L(P<0.05).结论 PDGF在急性白血病中高表达,可能与白血病的发生及疗效有关.

我国是乙型肝炎病毒(HBV)的高发区,每年有10%~20%的急性乙肝将转变成慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌,严重威胁人民健康.肝移植已成为目前治疗终末期肝病的最有效方法,而肝移植术后乙型肝炎高效价免疫球蛋白(Hepatitis B immunoglobulin,HBIG)的产生及动态变化是稳定病情、移植疗效观察、防止术后肝炎复发的良好指标.

煤储层具有大量的裂隙和孔隙,使煤岩具有很大的比表面积,为煤中甲烷的吸附提供了必要条件。采用自主研发的煤层气吸附装置,通过对沁水盆地寺河煤矿不同粒径煤粉的吸附性模拟实验,总结了不同粒径煤粉在吸附甲烷12 h内的吸附规律,计算出其中吸附气量,研究了吸附速率、吸附量的变化规律。研究认为:吸附的前10 min,吸附量占总吸附量的40%~60%,煤粉粒径越小,所占的比例越大,吸附越快;不同粒径煤粉的吸附量为15.1~29.1 mL/g,煤粉粒径越小,单位质量煤粉吸附量越大。通过对煤岩吸附规律的深入研究,为沁水盆地煤层气的勘探开发提供技术支持。

目的 通过液相芯片法和RT-PCR法检测EGFR基因突变的一致性,探讨适用于临床转移性肺癌患者EGFR基因的突变检测法.方法 收集47例转移性肺癌患者锁骨上肿物细针穿刺吸取物,经反复离心后取沉淀细胞行石蜡包埋,常规HE染色和免疫组化Multimer染色,利用液相芯片法和RT-PCR法检测EGFR基因19和21外显子的热点突变并进行分析.结果 47例转移性肺癌患者中15例检测到EGFR基因突变,突变率为31.9%,其中6例为外显子19缺失突变,9例为外显子21点突变.两种方法对EGFR外显子19和21的基因突变检测结果完全一致.结论 锁骨上吸取肿物可作为转移性肺腺癌患者EGFR基因突变的检测标本,且突变类型主要为外显子21点突变.液相芯片法和RT-PCR法均可作为转移性肺癌患者EGFR基因突变的检测法.

发展了一种以高分子羧甲基纤维素钠(Carboxymethyl cellulose,CMC)、NaF和H2O为原料,通过成形和烧结等程序制取多孔型NaF吸附剂颗粒的新方法。分析和表征结果指出,吸附剂比表面积为0.3–0.4m^2·g^-1,孔隙率为40%–45%,颗粒强度为60–80N。室温下,吸附剂对MoF6的平衡吸附量约37.8 mg MoF6/1g NaF。能谱(Energy Dispersive Spectrometry,EDS)分析指出,MoF6能够通过NaF颗粒的孔隙扩散到吸附剂的内部。预计该吸附剂可以用于氟化挥发中UF6的进一步纯化研究。

We validated a radioimmunoassay-based method quantifying fecal glucocorticoid metabolites (FGMs) from captive male and female Richardson's ground squirrels Urocitellus richardsonii. Blood samples were drawn to explore the correlation between plasma cortisol and FGM concentrations. We also injected groups of squirrels with normal saline (CTL; control), adre- nocorticotropic hormone (ACTH; stimulating adrenal activity), or dexamethasone (DEX; suppressing adrenal activity). Potential correlations between stress and behaviour were explored through quantification of fecal pellet production and the intervention necessary to elicit defecation, as well as the behaviour of subjects in the context of handling. Changes in plasma cortisol concen- tration between capture (baseline), and following handling (stress-induced) were also quantified for free-living squirrels. While glucocorticoid concentrations recovered from feces during our captive-animal study were not well correlated with plasma eortisol concentrations, and uncorrelated with defecation or behaviour, FGM concentrations did reflect the activation of the hypothalamic- pituitary-adrenal (HPA) axis. FGM concentrations increased significantly during initial captivity, but declined to baseline level as individuals acclimated to the novel environment. Injection of subjects with ACTH increased FGMs above baseline, confirming activation of the HPA axis. Plasma cortisol concentrations increased significantly with induced stress, indicating that capture and handling activated the glucocorticoid stress response even among previously handled, free-living subjects. Our findings validate a non-invasive tool that will afford new insight into the physiological processes underlying social, reproductive and antipredator behaviour of Richardson's ground squirrels [Current Zoology 60 (5): 591-601, 2014 ].

目的:建立大孔吸附树脂联用硅胶柱层析法分离纯化冬凌草甲素的工艺流程.方法:将冬凌草粉碎,用95%乙醇提取,浓缩成浸膏;以冬凌草甲素含量为指标,采用大孔吸附树脂联用硅胶柱层析法分离纯化冬凌草甲素,并用红外光谱、熔点测定和高效液相色谱(HPLC)法对重结晶产品的纯度和结构进行分析和表征.结果:优化的工艺为采用苯乙烯型大孔吸附树脂(HZ-841)先对浸膏进行粗分离,再选取乙酸乙酯-石油醚(6:4,V/V)为洗脱溶剂,石油醚-丙酮(2:3,V/V)为重结晶溶剂进行硅胶柱分离纯化,在此条件下,得到的冬凌草甲素含量为96.11%,提取率达到0.86‰.结论:所选工艺简单、可行,使用溶剂安全、无毒,提取效率高,可用于分离纯化冬凌草甲素.