-
Molecular cloning and identification of mouse epididymis-specific gene mHongl, the homologue of rat HongrES1
Shuang-Gang Hu, Han Du, Guang-Xin Yao, Yong-Lian Zhang - 亚洲男性学杂志(英文版)文章来源： 万方数据 -
人LMP-1基因腺病毒蚕组体的构建及其在骨肉瘤细胞U20S中的表达
目的:构建表达人LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)基因的腺病毒重组体,体外感染骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)细胞系U2OS,并鉴定LMP-1基因在U2OS中的表达.方法:以K562细胞的cDNA为文库,采用PCR方法对LMP-1进行扩增,通过TA克隆与pGEM-T载体连接并DNA测序.双酶切后并将目的基因插入至腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV,对腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV-LMP-1行双酶切和DNA测序鉴定,并通过荧光显微镜、RT-qPCR和Western blot检测pAdtrack-CMV-LMP-1在HEK-293T细胞中的表达.线性化pAdtrack-CMV-LMP-1,在BJ5183菌内完成与骨架质粒pAdeasy-1的同源重组,构建重组腺病毒质粒Ad-LMP-1.通过脂质体介导,在HEK-293A细胞内包装出复制缺陷的重组腺病毒Ad-LMP-1,大量扩增、纯化并测定滴度.用Ad-LMP-1感染OS细胞系U2OS,通过荧光显微镜、RT-qPCR和Western blot检测LMP-1在U2OS细胞中的表达.结果:双酶切和DNA测序鉴定穿梭质粒pAdtrack-CMV-LMP-1构建成功,荧光显微镜证实转染了pAdtrack-CMV-LMP-1质粒的HEK-293T细胞内有绿色荧光蛋白表达,RT-qPCR和Western blot验证了LMP-1基因的表达量明显高于对照组.通过扩增、纯化,Ad-LMP-1滴度达到1.5*109pfu/ml.荧光显微镜下观察重组腺病毒感染的U2OS内有绿色荧光蛋白表达,RT-qPCR和Western blot检测发现重组腺病毒感染U2OS后,LMP-1的mRNA和蛋白表达量明显高于对照组.结论:成功构建了人LMP-1基因腺病毒重组体,为进一步的实验研究奠定了基础.刘会文,黄路,韩智敏,罗嘉全,杨东,詹平,戴闽,曹凯 - 重庆医科大学学报文章来源： 万方数据 -
阻塞性睡眼呼吸暂停综合征合并高血压患者颈动脉内皮功能和血清C-反应蛋白水平变化的意义
目的探讨在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSAS)合并高血压患者血清C-反应蛋白(CRP)及颈动脉内膜中层厚度(IMT)的变化及相互关系.方法采用高分辨率超声检测健康对照组、OSAS组、高血压组和OSAS合并高血压组患者IMT.采用速率散射免疫比浊法检测各组患者血清CRP水平.结果OSAS合并高血压组患者IMT、血清CRP水平显著高于健康对照组、单纯OSAS组争单纯高血压组(P〈0.05).X^检验结果显示,CRP升高与IMT之间有统计学意义(P〈0.05),OR(95%CI)为4.329(3.837-5.641).结论血清CRP水平可以作为OSAS合并高血压患者将来发生心血管病变的预测指标.兰世才 - 四川医学文章来源： 万方数据 -
IL-10对TNF-a诱导肝星状细胞激活的抑制作用
目的探讨白细胞介素-10(IL-10)对肿瘤坏死因子-a(TNF-a)诱导的人肝星状细胞(HSC)激活的抑制作用.方法使用10ng/mlTNF-a刺激体外培养的HSC,建立HSC激活模型,给予HSC激活模型不同浓度IL.10(2、10、20ng/ml)作用不同时间(1、2、24、48、72、96h)后,油红O染色观察细胞脂肪含量,分别用Westernblot和RT-PCR检测a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平.结果TNF-a刺激后,HSC脂肪含量显著减少,a-SMA和MCP-1表达量水平均随时间延长而升高(P〈0.05).联合使用IL-10,a-SMA水平显著下降(P〈0.05),且具有浓度依赖性(P〈0.05),MCP-1水平亦下降(P〈0.05).结论IL-10可以抑制由TNF-a诱导的HSC激活,在肝脏早期炎症和肝纤维化进程中起保护作用.夏阳,戴夫,彭琼 - 安徽医科大学学报文章来源： 万方数据
科创中国
