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大鼠肝卵圆细胞系WB-F344恶性转化模型的构建及NOD/SCID小鼠成瘤实验
目的:通过N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)处理大鼠肝卵圆细胞系WB-F344,使其发生恶性转化,为研究肝癌的发生、发展提供有用的体外模型。方法以MNNG作用于WB-F344细胞系,使之发生恶性转化,并从形态学、遗传学、软琼脂克隆形成、NOD/SCID小鼠成瘤等方面加以验证。结果经MNNG诱导数代的WB-F344细胞出现恶性特征,表现为细胞形态改变,异倍体核型增多,肿瘤标志物表达增高,非锚定克隆能力增强,接种于NOD/SCID小鼠皮下可成瘤。结论肝卵圆细胞系WB-F344在MNNG的作用下可成为肝癌发生的有效体外模型。舒曼,张明辉,何潇潇,丁力,林原,曹清华,杨峥,薛玲 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
p110δ突变失活的 ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型的建立
目的:建立p110δ突变失活的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型,为研究p110δ在小鼠结直肠癌癌前病变中的作用提供实验模型。方法:将C57BL/6J背景的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠与p110δ突变失活小鼠(p110δD910A/D910A)进行杂交建系,通过PCR技术鉴定子代小鼠基因型,获得p110δ突变失活的ApcMin/+小鼠。对适龄小鼠进行肠道取材,亚甲蓝染色后,观察肠道结构,对腺瘤和微腺瘤进行统计。肠道组织进行石蜡包埋、切片,做HE染色进行进一步观察。结果:获得p110δ突变失活的ApcMin/+杂交鼠( ApcMin/+;p110δD910A/D910A )并得以稳定传代。 ApcMin/+;p110δD910A/D910A杂交小鼠的肠道组织中,腺瘤数目和体积比ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠均有减少。结论:成功建立p110δ突变失活的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型,并得到小鼠肠道肿瘤的初步表型,为进一步研究p110δ在肠道肿瘤发生发展中的作用提供重要的工具动物。胡曦文,章倩倩,雷岩,刘红英,周大磊,陈佳园,王丽京 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
外感温燥咳喘病机的实验研究
目的:研究温燥对气道组织结构与功能、黏液素基因(MUC5ac)表达和核因子NF-κB活性等影响.方法:138只SPF级昆明种小鼠随机分为常温常湿组、常温燥组、温燥组,每组46只.于处理后第6天与第12天行气管与肺组织超微结构观察、MUC5ac表达、NF-κB活性、气管纤毛运动(CM)、气道液黏多糖(MS)、IgG与分泌型IgA(SIgA)及二棕榈酰卵磷酯(DPPC)含量的影响.结果:与常温常湿组比较,常温燥组第6天、第12天气道组织改变不明显;温燥组气管上皮细胞鳞状化生与纤毛缺损、腺体化生伴炎性细胞浸润,肺泡瘀血伴肺气肿,超微结构显示Ⅱ型肺泡细胞(ATⅡ)嗜锇板层小体数量减少与线粒体肿胀;温燥组CM加快、MUC5a mRNA表达上调但NF-κB活性下降、RM、IgG、SIgA与DP-PC下降(P丁建中,张六通,向光盛,肖长义,黄江荣 - 辽宁中医杂志文章来源： 万方数据 -
大黄水提液防治小鼠癫痫的实验研究
目的:观察大黄水提液对实验性癫痫小鼠的防治作用.方法:采用最大电惊厥(MES)、戊四唑、士的宁等癫痫模型,分别给予大黄1、2、4 g/kg,日1次灌胃.观察动物的惊厥发作次数、发作潜伏期及动物存活时间.结果:大黄可减少MES发作次数,延长戊四唑、士的宁所致小鼠惊厥的发作潜伏期、改善痫性发作程度、缩短持续时间、降低死亡率,与模型组相比,差异具有统计学意义.结论:大黄水提液对癫痫有一定的防治作用,并存在一定的量效关系.张文风,杨焱 - 长春中医药大学学报文章来源： 万方数据 -
连续传代培养对 hUC-MSCs 上NLR 家族 mRNA 表达的影响
目的:探讨连续传代培养对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)表达NOD样受体(NLR)家族所有23个成员mRNA的影响,为改进hUC-MSCs传代培养质量与增加hUC-MSCs在实验和临床应用中的数量及安全性寻找切入途径。方法:取剖宫产无菌新生儿脐带,经胶原酶II消化结合贴壁选择分离纯化hUC-MSCs,并连续传代培养;采用流式细胞术、诱导分化和RT-qPCR对连续培养传代前后的hUC-MSCs(第3和28代)进行鉴定并对23个NLR家族成员mRNA的表达进行定量分析。结果:连续传代培养前后hUC-MSCs的细胞表型均为CD29+/CD44+/CD105+/CD31-/CD34-/CD40-/CD45-/CD106-/HLA-DR-,能被诱导为成骨和脂肪细胞,符合国际细胞治疗协会建议的MSCs基本特征。全部NLR家族成员的mRNA在培养第3代hUC-MSCs上均有表达,且NOD1、NLRC4、NL-RC5、NLRP1、NLRP3、NLRP10、NAIP、NLRX1和APAF1高表达,其余成员低表达。培养传代至第28代除NLRP10的mRNA表达上升、NLRC5和NLRX1 mRNA表达基本不变外,其余成员的mRNA表达均有所下降,其中NLRP1 mR-NA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体外连续传代培养对hUC-MSCs表达NLR家族成员的影响是多向性的。这些影响与MSCs的增殖、分化及其免疫调节功能的联系有待进一步实验探讨。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
卡托普利对 AGS 胃癌裸鼠移植瘤模型的调控作用
目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对胃癌发生与发展的调控作用,探索其应用于胃癌临床治疗的可行性。方法:制备AGS裸鼠移植瘤模型,随机分为3组:阳性对照(5-氟尿嘧啶,5-Fu)组、对照(生理盐水)组和实验(卡托普利)组。各组分别腹腔注射或灌胃后,观察肿瘤生长情况,组织取样,采用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测Ki-67、STAT3、Bax和Bcl-2表达情况,TUNEL+DAPI染色法检测细胞凋亡。 Western blotting检测STAT3及p-STAT3表达。结果:造模成功后,各组小鼠均出现差异不明显的肿瘤结块。14 d后,各组差异明显加大。对照组裸鼠肿瘤块生长最快,卡托普利组次之,阳性对照组最慢。实时荧光定量PCR与免疫组化检测结果显示,卡托普利组Bax较对照组表达升高,而STAT3、Ki-67以及Bcl-2的表达则降低(P<0.05),卡托普利组上述因子表达趋势与5-Fu组表达趋势相一致,但2组间差异显著( P<0.05);凋亡结果显示,相较于对照组,其它2组细胞凋亡率明显升高( P<0.05);Western blotting结果也显示,5-Fu组及卡托普利组的p-STAT3与STAT3蛋白表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论:血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对AGS裸鼠胃癌有较为明显的治疗效果,推测其可能具有较为可行的应用性。其分子机制可能是通过对STAT3转录活化因子以及Bax、Bcl-2、Ki-67等的调控,促使肿瘤细胞凋亡或抑制其生长。李力,金震东,蔡敏,王斌,程烽涛 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
病理制片中一些难题的解决体会
组织切片是科学研究和常规组织病理学形态变化观察,进行疾病诊断的基础,是取得准确科研结果的先决条件.好的切片能全面观察组织的病理变化,获得客观、准确、可靠的诊断依据和研究结论.因此,制作一张高质量的切片就是科研活动的开始.我们在制作人体鼻窦组织、小鼠肝脏、小鼠脾脏切片中的一些体会,现报道如下.1人鼻窦组织的制作体会正常鼻窦组织2层黏膜下有1层非常薄的骨片<55μm;正常钩突黏膜两侧为黏膜,中间有一层菲薄的骨片,厚董金彪,王全刚,张盛忠 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
心肌组织特异性高表达核仁素转基因小鼠的构建与鉴定
目的:构建并鉴定心肌组织特异性高表达核仁素( Ncl )的转基因小鼠,为从整体水平上研究核仁素对心肌功能的影响及其发挥心肌保护作用的机制提供动物模型。方法:采用基因重组法将小鼠核仁素基因的全长cDNA插入含心肌细胞特异性启动子的Alpha-MyHC clone 26载体,构建Alpha-MyHC clone 26-Ncl重组载体,通过双酶切及基因测序鉴定其正确性;采用PCR鉴定阳性小鼠并用Western blotting法观察转基因小鼠中核仁素的表达情况,采用组织切片及HE染色法观察转基因小鼠心肌组织形态;测量心脏重量指数和左室压最大上升速率,观察核仁素在心肌组织高表达后对小鼠心脏形态功能是否有影响。结果: PCR法观察显示获得4只阳性小鼠(51、52、56和86,其中52和86系繁殖良好),Western blotting结果表明转基因小鼠的核仁素表达量明显高于野生鼠,HE染色等结果表明核仁素对心肌形态学、心脏/体重比值及心功能无明显影响。结论:成功制备了心肌组织特异性高表达核仁素的转基因小鼠,与野生型小鼠相比,转基因小鼠心肌形态及心功能无明显差异。刘艳娟,周斌,蒋碧梅,童中艺,孙丽,李媛彬,肖献忠 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
SGT基因在小鼠深静脉血栓形成中的作用
目的 探讨SGT(small glutamine-rich tetratricopeptide repeat-containing protein)在深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)形成中的作用.方法 分别对SGT基因敲除小鼠及野生型对照鼠进行下腔静脉结扎建立DVT模型,观察建模后两种小鼠体内血栓形成情况,测定出血时间、凝血时间、血栓重量及长度.HE染色观察血栓形成的病理形态特点,ELISA法检测血清中可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的表达.结果 与野生型对照鼠相比,SGT基因敲除小鼠在建模48 h后,裸血栓重量长度比明显减小,凝血时间和出血时间均显著延长,形成的血栓中纤维蛋白所占比例较小;SGT基因敲除小鼠血清中sICAM-1表达水平显著低于对照鼠,IL-6的表达水平差异无统计学意义.结论 SGT基因敲除能有效抑制DVT的形成,其作用机制可能与血小板功能受影响及细胞间黏附分子表达改变有关.顾取良,黄韧,胡曦文,勾红菊,周晓明,郑凌云,王丽京 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
顺铂致小鼠急性肾功能损伤模型的建立
目的 建立顺铂致小鼠急性肾功能损伤动物模型.方法 腹腔注射顺铂10 mg/kg,以造成小鼠急性肾损伤模型,空白对照组给予等量生理盐水.给药后第8日,戊巴比妥钠麻醉小鼠,取血,检测血清中肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)水平,并对各组动物的肾脏组织进行病理学检查.结果 模型组动物血清CRE、BNU显著升高,肾系数降低,肝脏系数增加,体重增长及免疫器官重量均受到抑制.肾脏病理结果显示,模型组动物肾小管上皮细胞浑浊肿胀,结构不清,有轻度纤维增生,肾间质有炎性细胞浸润灶.结论 7~8周龄成年小鼠一次性腹腔注射给予顺铂10 mg/kg可成功建立急性肾损伤动物模型.杨喜花,张生万,任连生,白喜花 - 实验动物与比较医学文章来源： 万方数据
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