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转化生长因子-β受体抑制剂复合物C促进人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞定向诱导

目的观察转化生长因子-β(TGF-β)受体抑制剂复合物C对人胚胎干细胞(hESC)向视网膜色素上皮(RPE)细胞定向诱导效率的影响.方法将H1 hESC分为对照组和实验组.对照组在细胞过度融合后,以去除碱性成纤维细胞生长因子的血清替代物培养体系诱导RPE细胞定向分化.实验组于诱导分化前6d在培养体系中加入1μmol/L复合物C.诱导分化第1、3、5周,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组人类配对盒基因(PAX6)、小眼球相关转录因子(MITF)、细胞视黄醛结合蛋白(CRALBP)、RPE65 mRNA的表达.将hESC来源的RPE(hESC-RPE)细胞分离纯化,采用RT-PCR、蛋白免疫印迹法(Western blot)和细胞免疫荧光法对纯化的hESC-RPE细胞进行鉴定.结果诱导分化第4周,实验组肉眼可见色素团块,对照组无色素团块出现.将实验组的色素细胞分离纯化后,可见l00%的细胞表现为多角形色素化.RT-PCR检测结果显示,实验组PAX6 mRNA表达在诱导分化第1、3周显著高于对照组,差异有统计学意义(t=28.498、3.141,P<0.05);诱导分化第3、5周,实验组MITF(t=8.866、10.111)、CRALBP(t=5.293、5.394)和RPE65(t=9.263、9.504)的表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).hESC-RPE细胞PAX6、MITF、CRALBP、RPE65 mRNA表达均显著高于hESC(t=9.154、17.284、18.204、44.194)和ARPE-19(t=7.605、16.770、18.190、44.190)细胞,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot检测结果显示,hESC-RPE细胞高水平表达RPE标志蛋白PAX6、RPE65.荧光显微镜观察发现,hESC-RPE细胞表达RPE细胞特异性标志蛋白PAX6、紧密连接蛋白-1.结论 TGF-β受体抑制剂复合物C能显著提高hESC向RPE定向诱导效率.

杨博宇,杨春波,于敏,李筱荣 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

补体受体1对补体激活的氧化应激状态下人视网膜色素上皮单层细胞屏障的保护作用

目的观察补体受体1(CR1)对补体激活的氧化应激状态下人视网膜色素上皮(hRPE)单层细胞屏障的保护作用.方法原代培养3~5代hRPE细胞,建立稳定的hRPE单层细胞屏障模型.500 μmol/L叔丁基过氧化氢和10%正常人血清处理hRPE细胞,建立hRPE单层细胞屏障补体激活的氧化损伤模型.将补体激活的氧化应激状态下hRPE单层细胞屏障分为模型组和CR1治疗组.模型组加入1 μl的磷酸盐缓冲液,CR1治疗组加入1 μl的CR1溶液使其终浓度为1μg/ml,继续培养4h.以正常hRPE单层细胞屏障作为正常对照组,检测模型组和CR1治疗组细胞的跨表皮细胞膜电阻(TER)值.酶联免疫吸附试验检测模型组和CR1治疗组血管内皮生长因子(VEGF)、趋化因子配体2(CCL2)、C3a、C5a、膜攻击复合物(MAC)的蛋白量.结果 hRPE单层细胞屏障于接种后3周稳定形成.模型组、CR1治疗组补体激活的氧化损伤hRPE细胞TER值分别为正常hRPE细胞的54.01%、63.48%.模型组与CR1治疗组补体激活的氧化损伤hRPE细胞TER值比较,差异有统计学意义(t=21.60,P<0.05).CR1治疗组VEGF、CCL2蛋白量分别较模型组下降了11.48%、23.47%;两组VEGF、CCL2蛋白量比较,差异均有统计学意义(t=3.26、2.43,P<0.05).CR1治疗组C3a、C5a、MAC蛋白量较模型组分别下降了24.00%、27.87%、22.44%;两组C3a、C5a、MAC蛋白量比较,差异均有统计学意义(t=9.86、2.63、6.94,P<0.05).结论 CR1对补体激活的氧化应激状态下hRPE单层细胞屏障具有保护作用,抑制补体激活、下调CCL2和VEGF表达可能是其机制.

王菁,蔡萌,李静,田蓉,林少芬,田景毅,李佳,俞德超,罗燕 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

共调节因子在乳腺癌ER信号转导通路中的作用

ER属于配体依赖的转录因子亚家族成员.雌激素可通过特异性结合并激活其受体传递信号,广泛调控机体的各种功能,如生殖功能、骨骼及其他组织的分化和维持等[1].ER介导的信号转导通路失调,可导致相关基因表达异常或改变细胞质内某些蛋白的功能,促使乳腺细胞增殖或抑制其凋亡,从而导致乳腺癌的发生;另外一些特殊的机制可促使乳腺癌由雌激素依赖型向雌激素非依赖型转化并造成治疗抵抗[2].在乳腺癌发

张燕,耿翠芝 - 中华乳腺病杂志(电子版)

文章来源：万方数据

音猬因子在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的观察音猬因子( Shh)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法收集2008年1月至2012年12月在武汉市第五医院手术治疗的乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织各46例。采用实时荧光定量 PCR法和免疫组织化学染色检测乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中 Shh mRNA和Shh蛋白的表达,并探讨Shh蛋白与乳腺癌临床病理特征的关系。计数资料比较采用χ2检验,计量资料比较采用独立样本t检验或单因素方差分析。结果乳腺癌组织中Shh mRNA表达水平明显高于癌旁正常乳腺组织(1.54±0.47比0.60±0.38,t=-12.02,P=0.000),Shh蛋白阳性表达率也明显高于癌旁正常乳腺组织[69.6%(32/46)比17.4%(8/46),χ2=25.48,P=0.000],并且其表达水平与乳腺癌的临床分期密切相关,患者临床分期越晚,Shh蛋白表达水平越高[Ⅲ期+Ⅳ期:Ⅰ期+Ⅱ期:77.8%(28/36)比4/10,χ2=5.28,P=0.022]。结论 Shh信号在乳腺癌组织中被激活。 Shh异常表达可能与乳腺癌的发生、发展相关,其可以作为一个潜在的肿瘤标志物应用于临床。

姚春,邵力伟,郑刚,刘锦修,郜朝霞,任德发,伍龙 - 中华乳腺病杂志(电子版)

文章来源：万方数据

热休克蛋白27致敏对大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的观察热休克蛋白27(HSP27)致敏对大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响.方法 35只雌性Wistar大鼠分为HSP27致敏组、硼酸盐缓冲液(BBS)对照组、正常组,分别为15、15、5只大鼠.给予HSP27致敏组大鼠后肢皮下注射100μg的HSP27和完全弗式佐剂,腹腔注射1μg百日咳毒素.BBS对照组大鼠于相同部位注射等量BBS.正常组大鼠不作任何处理.注射前3d及注射后3d,1、2、4、6、8周,检测大鼠双眼眼压.注射后4、6、8周行视网膜冰冻切片,采用原位末端标记法检测RGC的凋亡情况,计算细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清和脑脊液中HSP27抗体的含量.结果 HSP27致敏组、BBS对照组、正常组大鼠注射前后眼压均无明显波动,差异均无统计学意义(P>0.05).HSP27致敏组于注射后4周即可见RGC凋亡,注射后6周凋亡的RGC明显增多.BBS对照组及正常组均未见RGC凋亡.HSP27致敏组大鼠血清、脑脊液中HSP27抗体含量分别于注射后4、6周出现高峰,然后随着注射时间延长而递减.注射后4、6、8周,HSP27致敏组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量分别与BBS对照组、正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);BBS对照组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 HSP27致敏可促进大鼠RGC的凋亡.脑脊液中HSP27抗体含量与RGC凋亡趋势一致.

赵薇,戴乐,唐志屏,曾勇,李燕 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

水分亏缺对稻米蛋白质组分的影响

以优质籼稻为材料,通过2年盆栽试验,研究不同土壤水分处理后稻米蛋白质及其组分含量特征.结果表明,土壤水分对稻米蛋白质及其各组分含量有较大影响,随土壤水分逐渐亏缺显示出其含量增高的趋势,尤其是醇溶蛋白;土壤水分对蛋白质各组分所占比例影响较小,随着土壤水分降低,蛋白组分中醇溶蛋白所占比例有升高趋势,谷蛋白则有降低趋势.各处理蛋白质含量与其各组分均具显著正相关,与醇溶蛋白含量间相关系数最小.水分亏缺有助于提高稻米蛋白质含量和赖氨酸含量,但可能会降低稻米蛋白质中赖氨酸含量,并可能对食味品质具有一定负面影响.

路兴花,庞林江 - 食品与机械

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肾素释放机制及肾素抑制剂的研究进展

肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)已被发现多年,对其功能的传统认识是维持血压、保持体液特别是钠盐平衡,其对肾脏系统起重要作用[1].近年研究证实还有许多血流动力学以外的作用.肾素的产生部位相对局限,主要由肾小球球旁器(juxtaglomerular apparatus,JGA)中的颗粒细胞所合成[1].刺激肾素分泌的关键有4个方面:

高燕红,蔡珂丹,罗群 - 中国病理生理杂志

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重组腺相关病毒-多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子对氧诱导视网膜新生血管形成的抑制作用

目的观察重组腺相关病毒(rAAV)-多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子(PSF)对氧诱导视网膜新生血管的抑制作用.方法 7日龄C57BL/6J小鼠18只,随机分为正常组、rAAV-PSF注射组、rAAV注射组,各组均6只.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠视网膜组织中PSF的表达.7日龄C57BL/6J小鼠48只随机分为正常组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、OIR rAAV-PSF治疗组、OIR rAAV治疗组,各组均为12只.除正常组外,其余各组小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)%的氧箱内饲养5d后转移至正常环境中饲养5d,建立OIR模型.12日龄时,OIR rAAV-PSF治疗组小鼠玻璃体腔注射病毒滴度为5×1013pfu/ml的rAAV-PSF重组载体2μI; OIR rAAV治疗组小鼠玻璃体腔注射相同病毒滴度的单纯rAAV载体2μl.OIR模型组小鼠出氧箱后不作任何处理.石蜡切片苏木精-伊红染色并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核;Western blot检测视网膜中VEGF蛋白表达含量.结果正常组小鼠视网膜PSF蛋白表达与rAAV-PSF注射组比较,差异有统计学意义(F=16.05,P=0.001),与rAAV注射组比较,差异无统计学意义(F=16.05,P=0.890).正常组、OIR模型组、OIR rAAV-PSF治疗组、OIR rAAV治疗组突破内界膜的视网膜新生血管内皮细胞核数比较,正常组与OIR模型组差异有统计学意义(F=101.00,P=0.007);rAAV-PSF治疗组与OIR模型组差异有统计学意义(F=101.00,P=0.002);OIR rAAV治疗组与OIR模型组差异无统计学意义(F=101.00,P=0.550).各组视网膜VEGF蛋白表达比较,正常组与OIR模型组差异有统计学意义(F=13.20,P=0.005),OIR模型组与OIR rAAV-PSF治疗组差异有统计学意义(F=13.20,P=0.001);OIR模型组与OIR rAAV组差异无统计学意义(F=13.20,P=0.071).结论 rAAV-PSF玻璃体腔注射可以抑制OIR小鼠视网膜VEGF表达,从而抑制其新生血管生成.

田芳,东莉洁,周玉,王飞,张晓敏,李筱荣 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

白三烯受体拮抗剂在儿童支气管哮喘治疗中的临床应用

目的:探讨白三烯受体拮抗剂治疗儿童支气管哮喘的临床疗效.方法:选择我院2011年1月至2012年12月收治的198例支气管哮喘患儿,随机分为治疗组和对照组各99例.两组患者均给予β2受体激动剂、茶碱类药物至临床症状、体征消失后停用.对照组患儿给予糖皮质激素布地奈德气雾剂吸入治疗,治疗组患儿给予白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠片治疗,3~6岁每次4 mg,>6岁~12岁每次5 mg,每天1次,于每晚临睡前服用,3个月为1个疗程.观察两组患儿临床疗效、临床症状、体征消失时间及住院时间.结果:治疗组总有效率为94.95%,对照组总有效率为81.82%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组临床症状、体征消失时间及住院时间显著短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组在治疗过程中均未见明显不良反应.结论:白三烯受体拮抗剂治疗儿童支气管哮喘安全有效,可有效改善患儿临床症状、体征,值得临床推广应用.

陈晓君,朱红丹 - 儿科药学杂志

文章来源：万方数据

GnRH类似物对子宫腺肌病小鼠种植窗HOXA10和整合素b3的影响

目的评估GnRH激动剂与拮抗剂对他莫昔芬诱导的子宫腺肌病模型小鼠种植窗期内膜容受性的影响.方法使用他莫昔芬诱导子宫腺肌病模型小鼠,模型形成后分成三组分别给予生理盐水、GnRH激动剂、GnRH拮抗剂;另有两组正常小鼠注射GnRH激动剂和生理盐水作为对照.停止注射后与雄鼠合笼,每组小鼠分为两部分,一部分10只在种植窗期取子宫,检测内膜容受性指标整合素b3和HOXA10的蛋白表达以及转录水平;另一部分5只于交配后13.5 d处死并计算胚胎种植数.结果子宫腺肌病模型小鼠内膜容受性指标(整合素b3和HOXA10)下降而且没有胚胎种植,注射拮抗剂后,该种情况并没有改善;但经过GnRHa处理后内膜容受性升高,共有23个胚胎种植.但GnRHa未能够改善正常小鼠子宫内膜容受性以及胚胎着床数.结论激动剂可提高子宫腺肌病模型小鼠种植窗期内膜容受性,不能提高正常小鼠内膜容受性,拮抗剂不能提高子宫腺肌病模型小鼠内膜容受性.

杨青青,牛志宏,夏丽群,冯云 - 实验动物与比较医学

文章来源：万方数据