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SGT基因在小鼠深静脉血栓形成中的作用
目的 探讨SGT(small glutamine-rich tetratricopeptide repeat-containing protein)在深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)形成中的作用.方法 分别对SGT基因敲除小鼠及野生型对照鼠进行下腔静脉结扎建立DVT模型,观察建模后两种小鼠体内血栓形成情况,测定出血时间、凝血时间、血栓重量及长度.HE染色观察血栓形成的病理形态特点,ELISA法检测血清中可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的表达.结果 与野生型对照鼠相比,SGT基因敲除小鼠在建模48 h后,裸血栓重量长度比明显减小,凝血时间和出血时间均显著延长,形成的血栓中纤维蛋白所占比例较小;SGT基因敲除小鼠血清中sICAM-1表达水平显著低于对照鼠,IL-6的表达水平差异无统计学意义.结论 SGT基因敲除能有效抑制DVT的形成,其作用机制可能与血小板功能受影响及细胞间黏附分子表达改变有关.顾取良,黄韧,胡曦文,勾红菊,周晓明,郑凌云,王丽京 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
p110δ突变失活的 ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型的建立
目的:建立p110δ突变失活的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型,为研究p110δ在小鼠结直肠癌癌前病变中的作用提供实验模型。方法:将C57BL/6J背景的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠与p110δ突变失活小鼠(p110δD910A/D910A)进行杂交建系,通过PCR技术鉴定子代小鼠基因型,获得p110δ突变失活的ApcMin/+小鼠。对适龄小鼠进行肠道取材,亚甲蓝染色后,观察肠道结构,对腺瘤和微腺瘤进行统计。肠道组织进行石蜡包埋、切片,做HE染色进行进一步观察。结果:获得p110δ突变失活的ApcMin/+杂交鼠( ApcMin/+;p110δD910A/D910A )并得以稳定传代。 ApcMin/+;p110δD910A/D910A杂交小鼠的肠道组织中,腺瘤数目和体积比ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠均有减少。结论:成功建立p110δ突变失活的ApcMin/+结直肠癌癌前病变小鼠模型,并得到小鼠肠道肿瘤的初步表型,为进一步研究p110δ在肠道肿瘤发生发展中的作用提供重要的工具动物。胡曦文,章倩倩,雷岩,刘红英,周大磊,陈佳园,王丽京 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
TRPV1疼痛受体通过神经肽信号调节长寿与代谢
疼痛感觉与死亡率增加有关,但是痛觉是否直接影响老化尚未可知.美国科学家Riera等发现,TRPV1疼痛受体缺失的小鼠会变得长寿,在老年阶段呈现出年轻的代谢状态.TRPV1的缺失能阻止钙信号的级联反应,这种钙信号级联反应终止于脊髓痛觉神经元中由CREB调节的转录共激活因子CRTC1的核输出.在长寿的TRPV1基因敲除小鼠,CRTC1的核输出降低了神经肽降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP;来自支配胰岛的感觉神经末梢)的产量,随后促进胰岛素的郑媛媛 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
心肌组织特异性高表达核仁素转基因小鼠的构建与鉴定
目的:构建并鉴定心肌组织特异性高表达核仁素( Ncl )的转基因小鼠,为从整体水平上研究核仁素对心肌功能的影响及其发挥心肌保护作用的机制提供动物模型。方法:采用基因重组法将小鼠核仁素基因的全长cDNA插入含心肌细胞特异性启动子的Alpha-MyHC clone 26载体,构建Alpha-MyHC clone 26-Ncl重组载体,通过双酶切及基因测序鉴定其正确性;采用PCR鉴定阳性小鼠并用Western blotting法观察转基因小鼠中核仁素的表达情况,采用组织切片及HE染色法观察转基因小鼠心肌组织形态;测量心脏重量指数和左室压最大上升速率,观察核仁素在心肌组织高表达后对小鼠心脏形态功能是否有影响。结果: PCR法观察显示获得4只阳性小鼠(51、52、56和86,其中52和86系繁殖良好),Western blotting结果表明转基因小鼠的核仁素表达量明显高于野生鼠,HE染色等结果表明核仁素对心肌形态学、心脏/体重比值及心功能无明显影响。结论:成功制备了心肌组织特异性高表达核仁素的转基因小鼠,与野生型小鼠相比,转基因小鼠心肌形态及心功能无明显差异。刘艳娟,周斌,蒋碧梅,童中艺,孙丽,李媛彬,肖献忠 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
人大肠癌细胞系HCTll6中Sirt1基因敲除细胞株的构建
目的利用AAV介导的体细胞基因敲除技术,在人大肠癌细胞系HCTll6中对靶基因Sirt1进行敲除,达到基因沉默的目的.方法构建Sirtl打靶载体,通过病毒包装、感染、药物筛选、PCR鉴定、Westernblotting鉴定等步骤获得Sirt1基因敲除的细胞株.结果经过筛选和鉴定后获得两个Sirtl-/-阳性克隆,成功构建HCTll6Sirtl.一细胞系.结论通过体细胞敲除技术,我们成功地获得Sirtl敲除肠癌细胞株.贾一帆,张慧慧,王卫星,杜润蕾 - 医学研究杂志文章来源： 万方数据 -
Reduced prostate branching morphogenes,s in stromal fibroblast, but not in epithelial, estrogen receptor a knockout mice
Ming Chen, Chiuan-Ren Yeh, Chih-Rong Shyr, Hsiu-Hsia Lin, Iun Da, Shuyuan Yeh - 亚洲男性学杂志(英文版)文章来源： 万方数据 -
绿色荧光蛋白转基因小鼠不同源性间充质干细胞原代培养及生物学特性比较
目的:探讨绿色荧光蛋白转基因小鼠脐带和骨髓源性间充质干细胞( MSCs )的体外分离培养方法、生物学特性、表面标志及多向分化潜能。方法:应用Ⅱ型胶原酶消化培养法分离脐带MSCs及密度梯度离心法分离骨髓MSCs进行体外培养。在倒置显微镜下观察2种细胞的生长特点,运用生长曲线和MTT法检测其原代细胞增殖能力,台盼蓝法测定细胞传代成活率,采用流式细胞术测定2种第3代( P3)细胞DNA周期及表面标志物的表达,并比较其向成脂细胞和成骨细胞的分化潜能。结果:酶消化法分离培养的脐带MSCs 1 d后,细胞贴壁呈成纤维形,2 d后呈漩涡状生长且增殖明显,3 d后达80%融合即可传代;应用密度梯度离心法分离骨髓MSCs,体外培养4 d后,细胞贴壁呈圆形、梭形和多角形生长,5 d后呈克隆样生长且增殖明显,7 d后达80%融合即可传代。原代培养的脐带MSCs生长曲线近似“S”形,骨髓MSCs 生长曲线较平缓;MTT法显示脐带MSCs在3~5 d增殖较明显,骨髓MSCs 7 d后细胞增殖较明显。2种P3细胞传代成活率均为96%以上,G0/G1期细胞均为85%以上,无明显差异(P>0.05);2种P3细胞CD44、CD90和CD105阳性率均为(60.7±2.3)%以上高表达,CD45、CD19、CD14和CD79a均为(25.6±4.8)%低表达,两者无明显差异( P>0.05);2种MSCs在体外均具有向成骨细胞和成脂细胞分化的潜能,脐带MSCs向成骨及成脂细胞分化率均为90%以上,与骨髓MSCs的分化潜能比较有显著差异( P<0.05)。结论:脐带MSCs较骨髓MSCs具有较强的增殖能力及分化潜能。绿色荧光蛋白转基因小鼠的脐带MSCs可作为较好干细胞示踪的细胞源。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
外感温燥咳喘病机的实验研究
目的:研究温燥对气道组织结构与功能、黏液素基因(MUC5ac)表达和核因子NF-κB活性等影响.方法:138只SPF级昆明种小鼠随机分为常温常湿组、常温燥组、温燥组,每组46只.于处理后第6天与第12天行气管与肺组织超微结构观察、MUC5ac表达、NF-κB活性、气管纤毛运动(CM)、气道液黏多糖(MS)、IgG与分泌型IgA(SIgA)及二棕榈酰卵磷酯(DPPC)含量的影响.结果:与常温常湿组比较,常温燥组第6天、第12天气道组织改变不明显;温燥组气管上皮细胞鳞状化生与纤毛缺损、腺体化生伴炎性细胞浸润,肺泡瘀血伴肺气肿,超微结构显示Ⅱ型肺泡细胞(ATⅡ)嗜锇板层小体数量减少与线粒体肿胀;温燥组CM加快、MUC5a mRNA表达上调但NF-κB活性下降、RM、IgG、SIgA与DP-PC下降(P丁建中,张六通,向光盛,肖长义,黄江荣 - 辽宁中医杂志文章来源： 万方数据 -
大黄水提液防治小鼠癫痫的实验研究
目的:观察大黄水提液对实验性癫痫小鼠的防治作用.方法:采用最大电惊厥(MES)、戊四唑、士的宁等癫痫模型,分别给予大黄1、2、4 g/kg,日1次灌胃.观察动物的惊厥发作次数、发作潜伏期及动物存活时间.结果:大黄可减少MES发作次数,延长戊四唑、士的宁所致小鼠惊厥的发作潜伏期、改善痫性发作程度、缩短持续时间、降低死亡率,与模型组相比,差异具有统计学意义.结论:大黄水提液对癫痫有一定的防治作用,并存在一定的量效关系.张文风,杨焱 - 长春中医药大学学报文章来源： 万方数据 -
卡托普利对 AGS 胃癌裸鼠移植瘤模型的调控作用
目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对胃癌发生与发展的调控作用,探索其应用于胃癌临床治疗的可行性。方法:制备AGS裸鼠移植瘤模型,随机分为3组:阳性对照(5-氟尿嘧啶,5-Fu)组、对照(生理盐水)组和实验(卡托普利)组。各组分别腹腔注射或灌胃后,观察肿瘤生长情况,组织取样,采用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测Ki-67、STAT3、Bax和Bcl-2表达情况,TUNEL+DAPI染色法检测细胞凋亡。 Western blotting检测STAT3及p-STAT3表达。结果:造模成功后,各组小鼠均出现差异不明显的肿瘤结块。14 d后,各组差异明显加大。对照组裸鼠肿瘤块生长最快,卡托普利组次之,阳性对照组最慢。实时荧光定量PCR与免疫组化检测结果显示,卡托普利组Bax较对照组表达升高,而STAT3、Ki-67以及Bcl-2的表达则降低(P<0.05),卡托普利组上述因子表达趋势与5-Fu组表达趋势相一致,但2组间差异显著( P<0.05);凋亡结果显示,相较于对照组,其它2组细胞凋亡率明显升高( P<0.05);Western blotting结果也显示,5-Fu组及卡托普利组的p-STAT3与STAT3蛋白表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论:血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对AGS裸鼠胃癌有较为明显的治疗效果,推测其可能具有较为可行的应用性。其分子机制可能是通过对STAT3转录活化因子以及Bax、Bcl-2、Ki-67等的调控,促使肿瘤细胞凋亡或抑制其生长。李力,金震东,蔡敏,王斌,程烽涛 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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