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载脂蛋白A-I模拟肽D-4F对巨噬细胞源性泡沫细胞清道夫受体A1的抑制作用

目的:研究载脂蛋白A-I模拟肽D-4F对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)所诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞清道夫受体A1(scavenger receptor A1,SR-A1)的抑制作用及其机制.方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予不同浓度的D-4F(12.5、25和50 mg/L)、紊乱模拟肽sD-4F(50 mmol/L)处理1h或者5 mmol/L内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)抑制剂4-苯丁酸处理30 min后,再加入ox-LDL(100 mg/L)继续培养12 h.另外培养巨噬细胞给予50 mg/L D-4F或sD-4F处理1 h,再加入2 mg/L ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)处理4 h.MTT法检测细胞活力;试剂盒检测细胞内总胆固醇含量;分别采用免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术检测SR-A1和ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)蛋白和mRNA表达变化;采用多功能酶标仪检测DiI-ox-LDL摄取情况.结果:D-4F明显减轻ox-LDL所诱导的巨噬细胞损伤和细胞内的胆固醇蓄积.ox-LDL可显著上调SR-A1和GRP78表达,而D-4F对上述变化具有明显抑制作用,且呈浓度依赖性.D-4F显著抑制TM所诱导的SR-A1和GRP78蛋白水平以及巨噬细胞对ox-LDL的摄取.结论:D-4F可通过抑制SR-A1表达减轻ox-LDL所诱导的巨噬细胞内胆固醇蓄积和细胞损伤,其机制可能与抑制GRP78介导的ERS信号途径有关.

赵莉,姚树桐,陈军,苗成,李严严,田华,周健,翟雷,桑慧,王义围,秦树存 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

Habitat-dependent diversification and parallel molecular evolution: Water scavenger beetles as a case study

Habitat shift is a key innovation that has contributed to the extreme diversification of insects. Most groups are well-adapted to more or less specific environments and shifts usually only happen between similar habitats. To colonize a pro- foundly different habitat type does not only present ecological opportunities but also great challenges. We used Hydrophiloidea (water scavenger beetles) as a system to study transitions between terrestrial and aquatic environments. We estimated the diversi- fication rate of different clades using phylogenetic trees based on a representative taxon sampling and six genes. We also investi- gated possible evolutionary changes in candidate genes following habitat shifts. Our results suggest that the diversification rate is relatively slow (0.039-0.050 sp/My) in the aquatic lineage, whereas it is distinctly increased in the secondarily terrestrial clade (0.055-0.075 sp/My). Our results also show that aquatic species have a G (Glycine) or S (Serine) amino acid at a given site of COI, while terrestrial species share an A (Alanine) amino acid with terrestrial outgroups. This indicates that habitat factors may create selection pressure on the evolution of functional genes and cause homoplasy in molecular evolution [Current Zoology 60 (5): 561-570, 2014 ]

Ke-Qing SONG,Huai-Jun XUE,Rolf G BEUTEL,Ming BAI,Dong-Ju BIAN,Jie LIU,Yong-Ying RUAN,Wen-Zhu LI,Feng-Long JIA,Xing-Ke YANG - 动物学报(英文版)

文章来源：万方数据

微小RNA-294靶向抑制髓系细胞触发受体-1对脓毒症炎症因子的影响

目的探讨微小RNA-294(miR-294)靶向抑制髓系细胞触发受体-1(TREM-1)对脓毒症肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的影响.方法利用生物信息学预测miR-294可能靶向调控TREM-1基因.体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,分成非炎症期和炎症期,每期各分为细胞对照组(NC组)、NC拟似物(mimic)和抑制剂(inhibitor)转染组(NCm组、NCi组)、miR-294 mimic和inhibitor转染组(miR-294m组、miR-294i组)5组.用双荧光素酶报告基因系统进行功能验证.以TurboFectTM小干扰RNA转染细胞48 h(非炎症期)后,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞TREM-1 mRNA表达;以1 mg/L内毒素处理6h后(炎症期)收集上清液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-6、HMGB1浓度;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测TREM-1蛋白表达.结果 ①双荧光素酶报告基因系统证实TREM-1是miR-294的靶点.②非炎症期:miR-294m组TREM-1 mRNA表达(2-△△Ct)较NC组、NCm组明显降低(0.673±0.049比1.000±0.003、0.915±0.039,f1=2.184、t2=5.421,均P<0.001);miR-294m组TREM-1蛋白表达(灰度值)为NCm组的(50.00±1.19)%(t=41.586,P<0.001).③炎症期:miR-294m组TNF-α(ng/L)较NC组明显降低(1 547.18±47.18比2 702.11±327.20,t=4.212,P=0.010),IL-6(ng/L)较NC组、NCm组明显降低(505.28±33.33比837.66±69.43、918.72±119.39,t1=4.382、P1=0.015,t2=5.451、P2=0.021);TREM-1蛋白表达(灰度值)为NCm组的(51.33±0.88)%(t=63.368,P<0.001);各组HMGB1比较均无差异.结论 miR-294能靶向抑制TREM-1表达,减少内毒素诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌TNF-α和IL-6.

刘奕君,曹殿青,莫桂熙,张良清 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

微小RNA-146a调控肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1和肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达

目的观察转染微小RNR-146a(miR-146a)对肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)表达的影响,为探讨miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控机制奠定基础.方法将体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为miR-146a模拟物(mimic)组和阴性对照组,分别加入50 nmol/L Pre-miR miR-146a前体和Cy3标记的Pre-miR阴性对照进行转染,转染24 h后收集细胞,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-146a、IRAK-1 mRNA、TRAF-6mRNA的表达,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达.结果 miR-146amimic组miR-146a表达较阴性对照组上调了(24.55±6.14)倍(t=-6.643,P=0.003).细胞中IRAK-1和TRAF-6的mRNA表达分别为阴性对照组的(1.16±0.10)倍(t=2.701,P=0.054)和(1.19±0.16)倍(t=2.032,P=0.112).而IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达分别为阴性对照组的73.0%(t=-9.353,P=0.001)和64.1%(t=-6.839,P=0.002).结论 miR-146a mimic能成功转染肺泡巨噬细胞NR8383; miR-146a过表达后,能有效下调肺泡巨噬细胞中IRAK-1和TRAF-6的表达,其机制可能是在蛋白翻译水平的抑制.

黄萍,刘芬,曾振国,黄彩雪,邵强,夏亮,揭克敏,钱克俭 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

原发性高血压患者中抗α1肾上腺素受体自身抗体激活大鼠主动脉平滑肌细胞内NF-KB

目的:探讨高血压患者血清中抗α1肾上腺素受体自身抗体(autoantibodies against α1-adrenergic receptor,α1-AAs)拟去甲肾上腺素的激动样效应及胞内信号分子活化机制.方法:培养大鼠主动脉平滑肌细胞.将收集的原发性高血压病人血清进行免疫亲和层析法纯化,ELISA检测其滴度后以1:80刺激细胞,并设立不同的处理组.将α1-AAs刺激大鼠主动脉平滑肌细胞后,经Western blotting及免疫荧光方法分析胞内核因子κB (nuclear factor κB,NF-κB) 信号分子激活及表达状况.结果:Western bltting显示α1-AAs刺激组中胞内核因子NF-κB (p50)表达较空白对照组明显增强,且可被α1受体阻滞剂哌唑嗪和NF-κB拮抗剂PDTC明显抑制(P〈0.05).免疫荧光实验中,α1-AAs组荧光强度显著高于空白对照组和α1-AAs+哌唑嗪组(P〈0.01).结论:高血压患者血清中α1-AAs能够致大鼠主动脉平滑肌细胞NF-κB活化.

孙艳香,袁勇,冯力,廖玉华,朱峰 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

高迁移率蛋白1、Toll受体与动脉粥样硬化的关系

动脉粥样硬化是血管慢性增殖性炎症过程,也是对血管损伤的反应和修复过程.高迁移率蛋白l作为一种重要的晚期炎症介质,参与多种炎性疾病的发生发展.Toll样受体是最重要的先天免疫系统的模式识别受体识别微生物的病原相关分子模式.高迁移率蛋白1可能通过Toll样受体激活炎性反应,参与动脉粥样硬化的发生和发展.

曾瑜,李家富 - 心血管病学进展

文章来源：万方数据

人子宫颈癌异常表达程序性死亡配体-1并促CD_4~+T和CD_8~+T细胞凋亡

目的:探讨程序性死亡配体-1 (Programmed death ligand-1,PD-L1)在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内CD4+T和CD8+T细胞浸润的相关性,体外实验观察重组人PD-L1蛋白对宫颈癌患者外周血T细胞凋亡的影响.方法:采用免疫组化SP法检测PD-L1在10例正常人宫颈组织和67例宫颈癌组织中的表达以及死亡受体-1(Programmed death receptor-1,PD-1)在宫颈癌内浸润淋巴细胞的表达;TUNEL法检测肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡;免疫荧光分析宫颈癌内浸润的CD4+T和CD8+T淋巴细胞数量;流式细胞术分析PD-L1促进宫颈癌患者外周血活化CD4+T和CD8+T细胞凋亡情况.结果:正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈癌PD-L1的表达率为70%(47/67).部分宫颈癌内浸润的淋巴细胞表达PD-1,且淋巴细胞存在凋亡现象.PD-L1阳性宫颈癌肿瘤内浸润的CD8+T细胞数量明显减少(P<0.05).体外实验发现PD-L1与健康人或宫颈癌患者外周血活化T细胞混合培养48 h后,T细胞凋亡率明显高于空白组,2组平均凋亡率分别为(32.8±1.4)%、(38.3±1.5)%(P<0.05)和(27.7±1.3)%、(30.9±1.9)%(P<0.05);抗PD-1抗体使PD-L1诱导的T细胞凋亡率下降,分别为(29.8±1.6)%和(31.6±1.4)%(P>0.05).PD-L1对人外周血活化CD4+T和CD8+T细胞均有促凋亡作用.结论:人子宫颈癌异常表达PD-L1与肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡及CD8+T细胞数量减少有关.PD-L1经PD-1促进活化的CD4+T和CD8+T细胞凋亡.

陈瑜,徐曼,肖琳,耿卫朴,王婷婷,黄文炼 - 重庆医科大学学报

文章来源：万方数据

运动性心脏肥大:AT1受体、细胞自噬和miRNAs的调节

心脏肥大可分为生理性肥大和病理性肥大.长期运动负荷可诱导心脏生理性肥大,使心肌结构发生平稳性、均匀性和协调性改变,并使其具备良好的细胞、亚细胞和分子结构等生理学基础,心肌能量代谢和心功能也明显提高[1].而心脏瓣膜病、高血压、心肌梗死和先天性心脏病等致病因素却能使心脏产生病理性肥大,导致失代偿性心力衰竭,表现为心室扩张和收缩功能障碍[2].因此,心脏生理性肥大和

钱帅伟,张瑞萍,张安民 - 中国病理生理杂志

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免疫球蛋白单体白细胞介素-1受体相关分子损害肺炎链球菌引起的肺炎和脓毒症期间的宿主防御

近日,荷兰研究人员对免疫球蛋白单体白细胞介素-1受体相关分子(SIGIRR)的作用进行了研究.肺炎链球菌是一种可以引起肺炎和脓毒症的普通细菌,Toll样受体(TLRs)在宿主防御中发挥着重要作用.他们用肺炎链球菌野生型和SIGIRR基因缺失(sigirr-/-)小鼠进行鼻内和静脉内感染来诱导肺炎和早期脓毒症,然后分别在6、24、48h处死小鼠,并且进行生存分析.

- 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

PD-L1阻断改善酵母多糖致伤小鼠脾脏耐受性 DC对T淋巴细胞活性的影响

目的:探讨酵母多糖致伤小鼠脓毒症病程发展过程中脾脏耐受性树突状细胞( dendritic cell, DC)的形成对脾脏T淋巴细胞免疫活性的影响,并通过程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-L1)抗体阻断PD-L1/PD-1途径改善耐受性DC对T淋巴细胞活性的抑制作用。方法采用酵母多糖腹腔注射的方法复制小鼠脓毒症模型。用磁珠法分离致伤小鼠脾脏DC和T淋巴细胞,测定脾脏组织中DC上PD-1、PD-L1、PIR-B的表达水平和分泌IL-12、IL-10的能力;检测脾脏T淋巴细胞增殖活性和IL-2的分泌水平。进一步将致伤组小鼠脾脏DC与正常小鼠脾脏T淋巴细胞混合培养,并加入PD-L1抗体,检测T淋巴细胞增殖活性及混合培养上清中IL-2、IL-12和IL-10含量。结果酵母多糖致伤后5天和12天组小鼠脾脏DC上PD-1、PD-L1及PIR-B的表达大幅上调,IL-12p70分泌减少,IL-12p40和IL-10分泌增加;脾脏T淋巴细胞增殖活性降低、IL-2分泌减少。在致伤组DC与正常T淋巴细胞混合培养体系中加入PD-L1抗体可减轻致伤组DC对T淋巴细胞增殖活性和分泌IL-2的抑制作用,并改善DC上IL-12p70、IL-12p40和IL-10的分泌能力。结论酵母多糖诱导小鼠脓毒症的病程晚期,脾脏耐受性DC的形成导致T淋巴细胞活性降低;PD-L1抗体通过干预PD-1/PD-L1途径改善T淋巴细胞和DC的免疫活性。

吕艺,刘茜,赵敏,陆江阳 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据