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人剪切修复基因XPD肝癌对人HepG2细胞中Rb和MAD2表达的影响
目的:探讨人剪切修复基因着色性干皮病D组基因(xeroderma pigmentosum group D,XPD)转染人肝癌HepG2细胞后视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma,Rb)和有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient 2,MAD2)表达的变化及对细胞增殖的影响.方法:将人工合成的pEGFP-N2-XPD重组质粒通过LipofectamineTM2000转染HepG2细胞.实验分为4组,分别为无转染HepG2细胞组(空白对照组)、脂质体转染HepG2细胞组(脂质体组)、空载质粒pEGFP-N2转染细胞组(N2组)和重组质粒pEGFP-N2-XPD转染细胞组(XPD组).分别用RT-PCR和Wesrn blotting法检测各组细胞中XPD、Rb及MAD2 mRNA和蛋白的表达量,用MTT法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组的细胞凋亡情况及细胞周期.结果:与其它3组相比,XPD组XPD mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.05),Rb mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.05),而MAD2 mRNA及蛋白表达量显著降低(P<0.05).XPD组细胞增殖活力显著降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05).XPD组细胞停滞在G1期,难以进入S期.结论:XPD可以抑制MAD2的表达和肝癌细胞的增殖,促进Rb的表达.张庆燕,赵慧,罗文,张吉翔 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
幼儿着色性干皮病伴发角化棘皮瘤1例
患儿男,1岁5个月,出生后3个月被日光照射后面部发红,出现多发粟粒状结节,误认为"湿疹",予以药膏涂抹症状缓解不明显,面部逐渐有色素沉着.1岁时发现左侧面部有一蚕豆大小结节,突出皮肤表面,2个月后自行消退,而后左眼下睑处发现一肿物,生长迅速,遂来就诊.查体:患儿双侧面颊、鼻唇处有密集大小不等的棕褐色雀斑样色素斑左眼下睑处有一肿物,突出皮肤表面,顶部破溃略凹陷(图1).入院后首次行色素沉着部位皮肤活检及肿物局部活检而后又完整切除肿物送病理检查.李慧,徐支芳,刘晓红,郑金峰 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
着色性干皮病基因D和p53对HBV复制的影响
目的:探讨人着色性干皮病基因D(XPD)和p53对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响.方法:使用脂质体转染法把重组质粒pEGFP-N2/XPD和空载质粒pEGFP-N2转染进入人肝癌细胞株HepG2.2.15细胞,转染后的第2天用20μmol/L pifithrin-α(p53抑制剂)孵育细胞24 h.实验共分为空白对照组、pEGFP-N2组、pEGFPN2/XPD组、pEGFP-N2/XPD+pifithrin-α组和pifithrin-α组.使用RT-PCR法检测XPD、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)及乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)mRNA表达的变化;使用ELISA法检测培养上清液中HBsAg和HBeAg含量的变化;用荧光定量PCR法检测培养上清液中HBV-DNA含量的变化;用bDNA法检测细胞内核心颗粒中HBV-DNA含量的变化.结果:RT-PCR结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染可使得XPD mRNA表达增高,XPD表达增高能使得HBsAg、HBeAg和HBx mRNA表达明显减少,而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用(均P<0.01).ELISA结果显示,XPD表达增高能使得培养上清液中HBsAg和HBeAg含量明显减少,而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用(均P<0.01).荧光定量PCR结果显示,XPD表达增高能使得培养上清液中HBV-DNA含量明显减少,而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用(均P<0.01).bDNA结果显示,XPD表达增高使得细胞内核心颗粒中HBV-DNA含量明显减少,而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用(均P<0.01).结论:XPD能通过p53通路抑制HBV复制,所以XPD和p53可能成为乙型肝炎抗病毒治疗的作用靶点.丁浩,张吉翔 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
人着色性干皮病基因D对HepG2细胞Mdm2和Mdm4表达的影响
目的:探讨人剪切修复基因着色性干皮病基因D(xeroderma pigmentosum D,XPD)对肝癌细胞鼠双微体2(murine double minute 2,Mdm2)和鼠双微体4(murine double minute 4,Mdm4)表达的影响.方法:用脂质体转染法将重组质粒pEGFP-N2/XPD和空载质粒pEGFP-N2转染进入人肝癌细胞株HepG2,实验分为3组:(1)空白对照组;(2) pEGFP-N2组;(3)pEGFP-N2/XPD组.用MTT法观察细胞的增殖活力;用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;用RT-PCR和Western blotting检测XPD、Mdm2、Mdm4和P53表达量的变化.结果:MTT结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染抑制了肝癌细胞的增殖活力;流式细胞术结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染引起了G1期细胞增加,S期减少,凋亡率增加.RT-PCR和Western blotting检测发现,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染使得XPD表达增高,同时使得Mdm2和Mdm4表达降低,P53表达增高.结论:XPD能下调肝癌细胞中Mdm2和Mdm4的表达,上调P53表达,并能抑制肝癌细胞增殖及诱导其凋亡.丁浩,张吉翔 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
名老中医治疗银屑病经验分享
银屑病又名"牛皮癣",是慢性复发性炎症性皮肤病.因有大小不等的红斑,覆盖银白色鳞屑,刮之可见点状出血等特征,中医学又称之为"白疕"、"干癣"、"松皮癣".该病病因不明,近年来发病率逐年增多,已被世界卫生组织列为21世纪人类十大顽症之一.该病初起多因风寒或风热之邪侵袭肌肤,以致营卫不和,气血不畅,阻于肌表而发病;或因湿热蕴积,外不能宣泄,内不可利导,阻于肌表而发病;病久刘淮,刘景桢 - 皮肤病与性病文章来源： 万方数据 -
人凝血因子Ⅷ血液制品中的病毒灭活与验证
目的:研究人凝血因子Ⅷ制备过程中S/D病毒灭活法和80℃、72 h干热灭活法的病毒灭活工艺的灭活效果。方法经过S/D法及80℃、72 h干热法双重处理灭活病毒,并通过加入指示病毒( PRV、Sindbis、HIV、EMCV、PPV)验证病毒灭活效果。结果上述工艺可有效灭活脂包膜和非脂包膜病毒。最终制品中TNBP残余量小于1/10万(10 ppm)、吐温-80(Tween-80)残余量小于1/万(100 ppm),符合安全标准,人凝血因子Ⅷ的生物活性及其他各项指标未发现明显变化。结论可以作为人凝血因子Ⅷ实验过程中的病毒灭活方法。闫晨,熊可强,王文姬,李玲 - 药学实践杂志文章来源： 万方数据 -
重甲基 SILAC 技术分析雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞组蛋白 H3甲基化的差异
目的:整体分析雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞组蛋白H3甲基化差异,探讨前列腺癌从激素依赖性发展为非激素依赖性的表观遗传机制。方法:应用重甲基细胞培养条件下氨基酸稳定同位素标记( SILAC)技术结合生物质谱分析雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP和非依赖性前列腺癌细胞DU145组蛋白H3的甲基化修饰谱,寻找差异的修饰位点和模式;通过Western blotting验证所发现的差异修饰;采用real-time PCR检测2株细胞相关甲基化酶和去甲基化酶的表达差异。结果:质谱鉴定发现2株前列腺癌细胞的组蛋白H3存在5个甲基化位点,甲基化模式分别为 H3K14me2、H3R17me1、H3K36me1、H3K36me2、H3K36me3、H3R72me2、H3K79me1和H3K79me2。其中,包含甲基化位点H3K36的肽段有2种,分别为“KSAPATGGVKKPHR”和“KSAPST-GGVKKPHR”,前者鉴定到的频数高于后者,两者的区别在于第31位的氨基酸分别为A与S,前者归属于组蛋白H3变异体H31T、H31和H32,主要出现在DU145细胞中,后者归属于组蛋白H3变异体H33,在LNCaP细胞中出现次数稍多;提示2株细胞可能表达不同的组蛋白H3变异体,从而导致甲基化模式的差异。 Western blotting检测发现H3K36的一甲基化和二甲基化在2株细胞间没有差异,而其在DU145细胞中的三甲基化程度显著高于LNCaP细胞。 Real-time PCR检测显示DU145细胞的H3K36去甲基化酶mRNA表达比LNCaP细胞有所降低。结论:组蛋白H3变异体和H3K36去甲基化酶的差异表达可能导致非激素依赖性前列腺癌细胞H3K36三甲基化增加,成为前列腺癌从激素依赖性发展为非激素依赖性的一种表观遗传转变。王启林,李瑞乾,金从国,赵斌,张国颖,白宇,雷永虹 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
尿微量白蛋白检测在早期糖尿病性肾病诊断中的临床意义
尿微量白蛋白是指尿液中白蛋白位于20~200 mg/L[1].我们采用深圳市国赛生物技术有限公司提供的尿微量白蛋白测定试剂盒,检测147例糖尿病(DM)患者的尿微量白蛋白浓度,探讨其对早期发现糖尿病性肾病(DN)的临床毛庆民,孙梅忠,许士春,尹箫 - 临床军医杂志文章来源： 万方数据 -
沉默NANOG表达对人肝癌细胞HepG2中cyclin D1表达及细胞增殖的影响
目的:探讨RNA干扰沉默NANOG表达后对肝癌细胞HepG2中细胞周期素D1 (cyclin D1)表达及细胞增殖的影响.方法:将以NANOG基因为靶点的NANOG-siRNA瞬时转染肝癌细胞HepG2,real-time PCR和Western boltting检测NANOG、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期情况.结果:与mock组比较,转染NANOG-siRNA后,肝癌细胞HepG2中NANOG、cyclin D1mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05),进入G0/G1期的细胞比例增多(P<0.05).结论:沉默NANOG表达可引起肝癌细胞HepG2中cyclin D1的表达下降,导致细胞增殖能力下降.周嘉嘉,陈汝福,邓小耿,周雨,周泉波,张杰,伍耀豪,曾乐祥,邱荣林 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
石榴皮鞣质对糖尿病模型大鼠肾脏氧化应激的影响
目的:研究石榴皮鞣质对糖尿病模型大鼠肾脏氧化应激反应的影响.方法:将50只SD大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素(75mg.kg-1)诱发实验性糖尿病,模型复制成功后随机分为模型(等容生理盐水)、维生素E(20mg.kg-1)与石榴皮鞣质高、中、低剂量(200、100、50mg.kg-1)组,另将10只SD大鼠作为正常对照组.灌胃给药,每天1次,连续21d.末次给药后观察大鼠日饮水量、日进食量,测定血糖(GLU)、血肌酐(Scr)、尿素(Urea),取一侧肾脏匀浆后测肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)活性、丙二醛(MDA)含量,另一侧肾脏做病理形态学检查.结果:与模型组比较,石榴皮鞣质高、中、低剂量组日饮水量、日进食量显著减少(P杨林,谭红军,汪念,梅志刚,王明智,曾永保 - 中国药房文章来源： 万方数据
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