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Ag85B慢病毒抑制人支气管上皮细胞TSLP及其受体的表达
目的:研究结核分枝杆菌抗原85B(Ag85B)慢病毒对正常人支气管上皮细胞(NHBEC)表达胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)和其受体TSLPR的影响,探究Ag85B抑制哮喘气道炎症的机制.方法:将Ag85B基因重组质粒转入293T细胞,构建携带Ag85B和EGFP报告基因的慢病毒载体p LVXIRES-Neo-EGFP-Ag85B(Ag85B慢病毒).用鉴定后的Ag85B慢病毒感染HEK293细胞,计算滴度并观察感染效率.利用Lipofectamine? 2000使Ag85B慢病毒感染体外培养NHBEC,设立空病毒感染和空白对照组.Real-time PCR和Western blotting检测Ag85B、TSLP和TSLPR mRNA和蛋白表达水平.结果:成功构建Ag85B慢病毒感染NHBEC体系,Ag85B慢病毒感染NHBEC 48 h后,荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白表达,细胞生长状态良好,病毒滴度为2*1011TU/L,感染效率达到90%以上.Real-time PCR和Western blotting结果显示Ag85B慢病毒成功感染NHBEC,可见相应Ag85B mRNA和蛋白表达.与空病毒感染和空白对照组比较,Ag85B慢病毒感染组TSLP mRNA表达有下降趋势,TSLPR mRNA与TSLP和TSLPR的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).结论:Ag85B慢病毒感染NHBEC可以抑制NHBEC的TSLP和TSLPR的表达,提示Ag85B可能通过靶向阻滞TSLP-TSLPR途径抑制哮喘气道炎症.房祥峰,钱江,孟锦绣,李东风,吴健 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
抗胸腺基质淋巴细胞生成素抗体能减轻过敏诱发的哮喘反应
胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是一种来源于上皮细胞的细胞因子,它在过敏性炎症反应的启动过程中起着重要的作用.AMG157是一种人抗TSLP单克隆Ig2λ抗体,它能与人的TSLP结合,从而阻断TSLP与其受体的结合.罗红敏 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
雪胆素乙诱导刀豆蛋白A刺激的小鼠淋巴细胞凋亡及其机制的研究
目的:分析雪胆素乙(CuIIb)对刀豆蛋白 A(Con A)刺激的小鼠淋巴细胞体外凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:以Annexin V染色结合流式细胞术分析小鼠淋巴细胞凋亡情况;利用JC-1染色分析淋巴细胞线粒体膜电位变化;Western blotting检测凋亡相关蛋白变化.结果:CuIIb处理后,早期和中期凋亡细胞比例明显增加,淋巴细胞线粒体膜电位降低.同时,CuIIb以剂量依赖方式激活caspase-3凋亡通路并明显降低抗凋亡蛋白survivin的表达.结论:CuIIb诱导淋巴细胞凋亡,其机制可能与其降低线粒体膜电位、激活caspase-3凋亡通路有关.胡波,施资坚,王遥,刘坤鹏,潘浩,尹良红 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
重组人促红细胞生成素对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用
目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用.方法 SD大鼠40只,随机分为空白对照组、实验对照组、模型组、rhEPO 1组[造模前3天注射rhEPO 3 000 IU/(kg·d)]、rhEPO 2组[造模前3天注射rhEPO 600 IU/(kg·d)],观察造模前、造模后48、72 h血清肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)的变化,观察肾脏病理标本.结果 模型组注射对比剂后48 h和72 h Scr均较注射前升高大于25%;与空白对照组比较,模型组、rhEPO 1组、rhEPO 2组造影后48、72 h Scr、BUN均明显上升(P < 0.05);与模型组比较,rhEPO 1组、rhEPO 2组造影后48、72 h Scr、BUN均有明显下降(P < 0.05),肾组织损害较模型组明显减轻.与rhEPO 2组比较,rhEPO 1组Scr、BUN降低更明显(P < 0.05).结论 重组促红细胞生成素对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤有保护作用,大剂量rhEPO保护作用优于小剂量.王文杰,戴春,吕昌云 - 中国医药导报文章来源： 万方数据 -
促红细胞生成素对压力超负荷大鼠心肌NADPH氧化酶表达的影响
目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对压力超负荷大鼠心肌NADPH氧化酶的影响.方法:36只SD雄性大鼠,腹主动脉结扎复制压力超负荷心肌肥大模型.动物随机分成3组:模型组;假手术组:除不缩窄腹主动脉外,其余操作同腹主动脉缩窄组;重组人促红细胞生成素(rhEPO)治疗组(EPO治疗组):术后给予rhEPO,腹腔注射4 000 U/kg,每周2次.8周后采用心动超声和血流动力学评价心功能;Masson染色观察心肌纤维化程度;实时定量PCR法和Western blotting法检测NADPH氧化酶2(Nox2)和Nox4 mRNA及蛋白表达的变化;Western blotting法观察心肌炎症因子CD45、F4/80和转化生长因子β(TGF-β)的表达变化.结果:与模型组比较,EPO治疗组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室收缩末压(LVESP)及左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)明显升高(P<0.01),左室收缩末内径(LVESD)、舒张末内径(LVEDD)及左室舒张末压(LVEDP)下降(P<0.01);同时,EPO可降低压力超负荷所致的心肌纤维化程度(P<0.01),降低心室肌中Nox2、Nox4 mRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)及心肌炎症因子CD45、F4/80、TGF-β蛋白的表达.结论:EPO可抑制压力超负荷所致大鼠的心肌纤维化,改善心功能,其机制可能与降低NADPH氧化酶活性,抑制心肌氧化应激水平,减少心肌炎症反应有关.王丽萍,范妤,韩曼 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
黑素生成素联合窄谱中波紫外线照射治疗儿童白癜风临床研究
目的:探讨黑素生成素联合窄谱中波紫外线(NB -UVB)照射治疗儿童白癜风的临床疗效及安全性。方法收集166例儿童白癜风患者,根据随机数字表法随机分为联合组和 NB -UVB 组各83例,联合组采用黑素生成素联合 NB -UVB 治疗,NB -UVB 组仅采用 NB -UVB 治疗,比较2组的临床疗效及不良反应。结果联合组患儿显效率明显高于 NB -UVB 组(P <0.05),联合组面颈、躯干、四肢及肢端显效率较 NB -UVB 组明显提高,但躯干、四肢、肢端提高幅度较面颈大,且有效率明显高于 NB -UVB 组(P <0.05);联合组皮损面积<5 cm 2、5~20 cm 2、>20 cm2显效率较 NB -UVB 组明显提高,但5~20 cm2、>20 cm2提高幅度较<5 cm2大,且5~20 cm2、>20 cm2的有效率明显高于 NB -UVB 组(P 均<0.05)。2组患儿均未发生明显不良反应。结论黑素生成素联合 NB -UVB 治疗儿童白癜风临床疗效优于 NB -UVB,安全可靠,是一种值得推广的有效方法。高岩 - 现代中西医结合杂志文章来源： 万方数据 -
5型腺病毒载体对人T淋巴细胞的转染及细胞毒性分析
目的:利用5型腺病毒载体转染人T淋巴细胞,对其转染T淋巴细胞的效率以及细胞毒性进行分析.方法:选取T淋巴瘤Jurkat细胞及原代T细胞,腺病毒按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为20、50、100、200和400对其转染,转染48 h后利用流式细胞术检测转染效率;选取腺病毒转染后的不同时点,利用碘化丙啶染色法分析转染对于细胞周期的影响;利用Annexin V/7-AAD染色法分析转染诱导细胞凋亡情况;利用台盼蓝染色计数法分析转染对活细胞数目的影响.结果:5型腺病毒载体转染T淋巴瘤的效率最高,转染效率随着MOI值的增大而增加;CD8+T细胞和CD4+T细胞的转染效率大致相同,T细胞经刺激活化后,CD8+T细胞的转染效率下降;病毒转染未导致明显细胞凋亡;病毒转染对细胞周期与活细胞数目没有显著影响.结论:5型腺病毒载体转染T细胞呈现较低细胞毒性.张文峰,张琼宇,邵红伟,吴凤麟,王腾,黄树林 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
急性呼吸窘迫综合征患者血浆血管生成素2水平及其对预后的诊断价值
目的:探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血管生成素2(Ang-2)的水平变化与肺损伤程度和预后的关系及其临床意义.方法采用前瞻性观察性研究方法,选择安徽医科大学第三附属医院重症医学科2012年1月至2014年3月收治的ARDS患者53例,按ARDS柏林定义分为轻度(15例)、中度(22例)、重度(16例)3组,按28 d转归分为生存组(29例)和死亡组(24例).以同期20例非ARDS患者作为对照.记录患者入院24 h内急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评分(SOFA)、氧合指数(PaO2/FiO2)、肺损伤评分(LIS),检测血浆Ang-2、白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)水平.采用单因素和多因素logistic回归方法分析影响ARDS预后的危险因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC),评价Ang-2在预测ARDS中的价值.结果与非ARDS组比较,ARDS组APACHEⅡ、SOFA、LIS评分明显升高, PaO2/FiO2明显降低,病死率明显增加,血浆Ang-2、IL-6、CRP水平明显升高〔APACHEⅡ(分):20.7±5.0比14.1±5.3,SOFA(分):7.7±3.5比3.5±2.1,LIS(分):1.69±0.71比0.28±0.27,PaO2/FiO2(mmHg,1 mmHg=0.133 kPa):159.5±61.3比394.0±63.2,病死率:45.3%(24/53)比20.0%(4/20),Ang-2(μg/L):4.73(2.59,6.99)比1.22(0.61,1.52),IL-6(ng/L):56.50(27.15,139.90)比13.05(4.38,15.55),CRP(mg/L):95.75(41.74,189.72)比10.56(3.92,21.36),P<0.05或P<0.01〕,且随病情加重,各指标逐渐恶化.相关分析显示,血浆Ang-2与IL-6(r=0.468,P=0.000)、CRP(r=0.492,P=0.000)、APACHEⅡ评分(r=0.560,P=0.000)、SOFA评分(r=0.508,P=0.000)、LIS评分(r=0.588,P=0.000)均呈明显正相关;与PaO2/FiO2呈明显负相关(r=-0.648,P=0.000).对单因素分析中有统计学意义的APACHEⅡ评分、LIS评分、PaO2/FiO2、Ang-2和钟明媚,张琳,王璠,彭松,张金,宣国平 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
积雪草免疫抑制活性成分的分离纯化及效应研究
目的:对积雪草的免疫抑制活性成分进行分离、纯化及鉴定,并观察其对小鼠脾淋巴细胞增殖和凋亡的影响,探讨其免疫调节机制。方法:利用半制备型液相色谱对积雪草提取物进一步分离和纯化。运用流式细胞术观察积雪草活性成分对脾淋巴细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。利用紫外光谱、电喷雾电离负离子模式质谱、[1 H ]核磁共振( NMR)、[13 C] NMR等数据鉴定所得活性成分结构。结果:(1)所得积雪草活性成分化合物Ⅰ、Ⅱ的分子量分别为302和286。(2)积雪草中化合物Ⅰ、Ⅱ能显著抑制小鼠脾淋巴细胞增殖。(3)积雪草中化合物Ⅰ、Ⅱ能促进小鼠脾淋巴细胞凋亡,降低线粒体膜电位。(4)[1H] NMR和[13C] NMR鉴定化合物Ⅰ、Ⅱ分别为槲皮素和山奈酚。结论:从积雪草中提取获得的黄酮化合物Ⅰ、Ⅱ分别为槲皮素及山奈酚,具有抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的效应,其作用途径可能是促进脾淋巴细胞凋亡并降低线粒体膜电位。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
血管生成素2在EV71感染性肺水肿中的作用研究
目的 观察肠道病毒71型(EV71)感染性肺水肿患儿的临床特点及血管生成素2(Ang-2)的变化,探讨Ang-2与肺水肿发生的关系.方法 前瞻性序贯收集2011年5月至2013年9月滨州医学院附属医院重症监护病房(ICU)的EV71感染性肺水肿患儿(肺水肿组)和EV71感染无肺水肿患儿(非肺水肿组)各20例,以同期年龄、性别匹配的20例择期腹股沟疝手术婴幼儿作为对照组.收集患儿入ICU时的生命体征、血常规、生化、胸片、脑脊液检查等资料;取严重肺水肿患儿的肺水和血清,检测总蛋白、白蛋白、Ang-2水平[酶联免疫吸附试验(ELISA)]及其肺水/血清比值.结果 肺水肿组死亡9例,非肺水肿组均存活.EV71感染患儿体温、心率、血压、白细胞计数(WBC)、血糖、肌酸激酶同工酶(CK-MB)均较对照组不同程度升高,白蛋白、氧合指数均不同程度降低.与非肺水肿组比较,肺水肿组心率、血糖、WBC升高更为显著[心率(次/min):181±31比146±19,t=3.397,P=0.003;血糖(mmol/L):14.9±9.8比6.3±1.5,t=2.793,P=0.012;WBC(×109/L):22.1±9.8比10.2±3.6,t=3.579,P=0.002],白蛋白及氧合指数(PaO2/FiO2)下降更为显著[白蛋白(g/L):33.6±5.9比42.7±2.9,f=3.258,P=0.004; PaO2/FiO2(mmHg,l mmHg=0.133 kPa):142±76比396±39,t=3.927,P=0.000].非肺水肿组和肺水肿组脑脊液压力均明显升高,有核细胞数正常或轻中度升高,以单核细胞为主,蛋白含量正常.肺水肿组血清Ang-2水平[236.17(167.63,366.65) ng/L]较对照组[19.67(8.72,33.68) ng/L]及非肺水肿组[23.46(13.28,46.77) ng/L]明显升高(均T=210,均P=0.000).采集了8例严重肺水肿患儿的肺水,其中总蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)、Ang-2均升高,肺水/血清总蛋白比值分别为0.67、1.33、1.12、0.72、0.84、0.73、1.09、1.24,肺水/血清白蛋白比值分别为0.72、1.64、0.84、0.87、1.06、0.92、1.12、1.48,肺水/血清LDH比值分别为2.33、4.45、2.89、3.61、3.40、3.72、3.37、4.13,肺水/血清Ang-2比值分别为0.98、1.10、1.17、1.05、1.20、0.92、1.03、1.17.结论 EV71感染性肺水肿患儿肺水中富含蛋白,且血清及肺水中均高表达Ang-2,Ang-2可能参与肺部血管渗漏、肺水肿的发病过程.齐志江,李志,郝东,王涛,高福泉,宁方玉,夏永富,王晓芝 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据
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