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siRNA沉默MAG促进脑出血后大鼠运动功能的改善
目的:研究慢病毒介导的siRNA沉默髓鞘相关糖蛋白(MAG)对脑出血后脱髓鞘再生和神经功能恢复的影响.方法:SD大鼠45只,随机分为3组:模型+siRNA组、模型+PBS组和正常对照组,每组15只.胶原酶诱导建立脑出血模型,据不同组别于模型术后1d立体定向下进行侧脑室注射携带MAG基因siRNA的慢病毒和PBS.分别于治疗前1d和治疗后1、7、14、21 d用Rotarod运功功能评分检测大鼠神经功能情况,应用劳克坚牢蓝(luxol fast blue)检测脑损伤区的神经纤维恢复情况,利用免疫组化和Western blotting检测MAG的表达变化.结果:Rotarod评分检测脑出血模型大鼠术后的运动功能,模型+siRNA组的神经功能改善和神经纤维修复较模型+PBS组明显提高(P<0.05),劳克坚牢蓝染色示siRNA组较PBS组的神经纤维损害范围缩小,siRNA组的MAG蛋白的表达较PBS组明显下降(P<0.05).结论:siRNA沉默MAG后明显提高神经纤维髓鞘再生能力,促进脑出血后神经功能缺失的修复.刘安民,罗铭,蔡望青,陈舒,何明亮,潘伟生 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血损伤后髓鞘碱性蛋白表达的影响
目的:用正交试验法验证胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血损伤的神经保护作用并优化其最佳治疗剂量及时间窗。方法:应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠前脑缺血模型,按照正交试验设计分组,经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗。固绿髓鞘染色法观察神经纤维髓鞘变化;免疫组织化学法和Western blotting 定性、定量检测髓鞘碱性蛋白( MBP)的表达;RT-PCR检测MBP mRNA水平。结果:胡黄连苷Ⅱ可上调大鼠脑缺血损伤后MBP表达,减少脱髓鞘;其最佳治疗时间和剂量,根据固绿髓鞘染色显示为脑缺血2.0 h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ10 mg/kg;免疫组织化学法分析为脑缺血2.0 h腹腔注射10 mg/kg;Western blotting分析为脑缺血2.0 h给予10 mg/kg;RT-PCR显示为脑缺血1.5 h给予20 mg/kg。结论:根据用药剂量最小化和治疗时间窗最大化的原则综合评价,胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血损伤的最佳治疗时间窗为脑缺血1.5~2.0 h,最佳治疗剂量为腹腔注射10~20 mg/kg。赵丽,郭云良 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
蛋白偶联受体56基因敲除抑制少突胶质前体细胞成熟
目的:探讨G蛋白偶联受体56(GPR56)基因敲除对小鼠脑胼胝体内轴突髓鞘化和少突胶质前体细胞(OPCs)成熟的影响.方法:筛选出GPR56基因杂合型(GPR56^+/-)和敲除型(GPR56^+/-)小鼠36只,分为GPR56^+/-和GPR56I^+/-组,每组18只.每组根据小鼠出生后时间分为出生后7d(F7)、14d(P14)、21d(P21)和28d(P28)4个亚组.应用FluoroMyelin染色观察P14、P21和P28GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠脑胼胝体内髓鞘形成.用电镜观察P28GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠胼胝体内轴突髓鞘化,比较髓鞘的厚度.用荧光免疫组化染色观察P7GPR56^+/-和GPR56I/-小鼠胼胝体内血小板源性生长因子α受体阳性(PDGF-αR+)细胞(即OPCs)的数量.用原位杂交监测P28GPR56+ -和GPR56I/-小鼠胼胝体内髓鞘蛋白脂质蛋白阳性(PLP+)细胞数.用出生后1d的GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠脑皮质做体外OPCs培养并诱导其分化成熟,观察pro-oligodendroblast、immatureoligo-dendrocyte和matureoligodendrocyte阶段04+细胞百分比.结果:与GPR56^+/-小鼠比较,在P14、P21和P28GPR56I^+/-小鼠脑胼胝体中髓鞘的形成明显减少.电镜见P28GPR56^+/-小鼠脑胼胝体内髓鞘化轴突的数量明显减少,髓鞘g-ratio值变大,髓鞘厚度变薄.荧光免疫组化和原位杂交结果显示P7GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠胼胝体内PDGF-aR+细胞数量无差异,但P28GPR56+/-小鼠胼胝体内PLP+细胞数明显多于P28GPR56^+/-小鼠.体外细胞培养结果显示在pro.oligodendroblast阶段GPR56^+/-04+细胞百分比明显多于GPR56^+/-04+细胞,在immatureoligodendroeyte和matureoligodendrocyte阶段GPR56^+/-04+细胞百分比明显少于GPR56^+/-04+细胞.结论:GPR56蛋白可能参与了脑白质轴突髓鞘化和OPCs的成熟.邓医宇,朱高峰,方明,曾文新,蒋文新,曾红科 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
环孢菌素D衍生物PSC833逆转K562/DOX细胞的凋亡抗性及其机制
目的:研究环孢菌素D衍生物PSC833对K562/DOX细胞多药耐药的逆转作用.方法:MTT法进行阿霉素(doxorubicin,DOX)和长春新碱(vincristine,VCR)的细胞毒测定;流式细胞术测定细胞周期;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;活性氧测定以DCFH-DA标记,线粒体跨膜电位测定用JC-1标记,细胞内钙测定用Fluo-3/AM标记,均以流式细胞术检测;Western blotting法测定细胞色素C(Cyt C)、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达.结果:环孢菌素D衍生物PSC833能显著增强DOX/VCR的细胞毒作用,使细胞阻滞在G2/M期;通过降低线粒体膜电位,升高细胞内活性氧和Ca2+水平,释放Cyt C、下调Bcl-2、上调Bax、激活cleaved caspase-3,增加DOX诱导的耐药细胞凋亡.结论:PSC833与DOX合用后,可阻滞细胞周期于G2/M期,通过线粒体通路诱导K562/DOX细胞凋亡.刘玲,王建刚,李艳,王淑英 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
胃癌中葡萄糖神经酰胺合成酶和P-gp的表达及意义
目的 分析葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)在胃癌组织中的表达及相关性,及二者与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法检测132例胃癌组织及癌旁组织中GCS和P-gp蛋白的表达;应用实时荧光定量PCR技术检测胃癌组织中GCS和P-gp mRNA的表达.结果 (1)胃癌组织中GCS、P-gp阳性率均高于癌旁组织(P<0.01).(2)胃癌组织中GCS与P-gp表达呈正相关(P<0.001).(3)胃癌组织中GCS和P-gp mRNA表达呈正相关(P<0.01).(4)胃癌中GCS阳性率与肿瘤浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期有关(P<0.05);P-gp阳性率与肿瘤大小、分化程度、浸润深度以及TNM分期有关(P<0.05).结论 胃癌组织中GCS不仅和P-gp与多药耐药有关,且可提示肿瘤的浸润、转移.胡萍萍,房栋,陈淼,陈谦,范钦和 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
糖尿病大鼠肾脏组织中XBP-1 s和ADRP的表达
目的:探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1, XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白( adipose differentiation related protein, ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构建糖尿病大鼠模型,正常喂养2个月后,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达。结果 XBP-1s和ADRP表达均定位于肾小管上皮细胞,对照大鼠相比,糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中XBP-1s和ADRP表达均显著增高,分别升高2.017倍和1.544倍,差异有统计学意义(t=2.648、2.741,P<0.05)。进一步行相关性分析显示:大鼠肾脏组织中XBP-1s表达增强往往伴随着ADRP的表达增强(相关系数为0.723,P<0.05)。结论 XBP-1s表达升高可能是导致糖尿病大鼠肾脏组织中ADRP上调的因素之一。朱琳,郝军,赵松,赵雪,陈宁,郑书深,段惠军 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
冠心病患者血清中纳米细菌与高敏C反应蛋白的关系
目的:检测冠心病患者血清中纳米细菌感染率与高敏C反应蛋白(hs-CRP)的浓度,并探讨其临床意义.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测冠心病组与对照组血清中的纳米细菌抗原,同时用免疫比浊法测定其血清中的hs-CRP,并进行相关性分析.结果:冠心病组血清纳米细菌感染率为27.08%(13/48),与对照组6.25%(3/48)比较,差异有统计学意义(P高劲松,李豫皖,彭忠,陈晓泉,游浩,李佳森,杨康,颜海燕,王夜明,周世力 - 临床心血管病杂志文章来源： 万方数据 -
Rock可能通过抑制PI3K/Akt通路促进缺氧诱导的心肌细胞凋亡
目的:通过建立体外心肌细胞缺氧模型,观察Rho相关的卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)在不同缺氧时点的表达,探讨其在心肌细胞凋亡中的作用.方法:(1)原代培养SD乳鼠心肌细胞,并用抗α-横纹肌肌动蛋白免疫组化法进行鉴定.(2)利用缺氧液和缺氧盒,建立心肌细胞缺氧模型,分别缺氧培养1 h、3 h、6 h、9 h,以正常氧培养的心肌细胞作为对照.(3)用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,MTT检测细胞存活率,Western blotting检测ROCK-1、ROCK-2、caspase-3活化片段、PI3K和p-PI3K的表达情况.结果:(1)缺氧1 h、3 h、6 h、9 h后,心肌细胞凋亡率分别为(8.76±1.51)%、(15.36±2.34)%、(26.50±3.43)%、(41.96±4.22)%,与对照组[2.60±0.34)%]比较均有显著差异(P<0.01);存活率分别为(93.20±4.12)%、(86.14±3.10)%、(75.53±7.25)%、(60.21±6.75)%,与对照组[(97.60±1.12)%]比较均有显著差异(P<0.05).(2)ROCK-1和ROCK-2缺氧1 h即开始升高,3~6 h表达达高峰,9 h开始回落,且均明显高于对照组(P<0.05).(3)Caspase-3在缺氧1 h开始逐渐活化,在随后观察的时点内持续处于活化状态,与对照组比较均有显著差异(P<0.01).(4)p-PI3K在缺氧1 h后开始升高,3 h达高峰,6 h开始回落,9 h表达基本消失,各时点比较差别有统计学意义(P<0.05).结论:ROCK-1和ROCK-2在缺氧后表达逐渐升高,与细胞凋亡的过程相一致.ROCK可能通过抑制p-PI3K信号途径,促进缺氧心肌细胞凋亡.董家龙,李菊香,孙国芳,洪葵 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
2型糖尿病患者糖化血红蛋白水平及其影响因素分析
目的:探讨2型糖尿病患者糖化血红蛋白(HbAlc)水平及其影响因素.方法:对社区1 680位居民进行糖化血红蛋白水平检测,对检出的2型糖尿病患者按HbAlc水平分为正常组和异常组,用Pearson相关分析HbAlc水平与生化指标的相关性,并用Logistic回归分析影响HbAlc水平的因素.结果:2型糖尿病患者为688例,两组患者在年龄、病程、经济状况等方面比较差异具有统计学意义,HbAlc水平与BMI、FPG、TC、LDL-c、HDL-c具有相关性(P<0.05),年龄、病程、经济状况、TC、BMI、FPG是HbAlc水平的主要影响因素,其相对危险性较高.结论:HbA1C水平是糖尿病的良好检测指标,年龄、病程、经济状况、TC、BMI、FPG是HbAlc水平的主要影响因素,其相对危险性较高.周劲梅 - 海南医学院学报文章来源： 万方数据 -
游离脂肪酸混合物对肝细胞脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响
目的:研究游离脂肪酸( FFA)混合物对肝细胞L-02的脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响。方法:正常肝细胞L-02分别用正常培养基和0.5、1、2 mmol/L FFA混合物(油酸和软脂酸的比例为2∶1)培养24 h后,尼罗红染液室温避光染色,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪确定细胞内脂质堆积情况。组织细胞酶法测定试剂盒测定细胞内甘油三酯含量。 MTT法分析细胞存活率,Annexin V-PI凋亡检测试剂盒分析肝细胞的凋亡情况,丙氨酸氨基转移酶( ALT)和天冬氨酸氨基转移酶( AST)测定试剂盒分别检测培养液中ALT和AST活性。实时定量PCR技术检测脂代谢相关的脂肪分化相关蛋白( ADRP )和固醇调节元件结合蛋白1( SREBP-1)的mRNA表达情况。结果:各浓度FFAs混合物均可剂量依赖性增加肝细胞脂肪堆积和肝细胞甘油三酯含量,且1 mmol/L FFA混合物可增高肝细胞的甘油三酯含量2.6倍,与非酒精性脂肪肝病人的变化基本相同。2 mmol/L FFA混合物可降低肝细胞L-02细胞存活率并诱导细胞凋亡,而0.5 mmol/L和1 mmol/L FFA混合物对细胞无明显影响。与对照组相比,各浓度FFA混合物对细胞上清中ALT和AST活性无明显影响。1 mmol/L FFA混合物作用后可分别上调肝细胞的ADRP和SREBP-1 mRNA的表达2.660和2.758倍。结论: FFA混合物可诱导肝细胞L-02脂肪变性且2 mmol/L FFA混合物可造成轻度细胞损伤。脂代谢相关基因ADRP和SREBP-1表达上调与FFA混合物诱导的脂肪变性相关。王辉,陈骁,项夏霖,彭鑫,王苑芳,刘填桂,黄树林,邵红伟 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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