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丹参果糖磷酸酶基因的克隆和功能研究
丹参是著名的药用植物,在中国、日本、美国和欧洲国家被广泛地用于心脑血管系统疾病的治疗.笔者首次从丹参中克隆出了一个新的果糖磷酸酶基因,并将其命名为SmFBA,GenBank编号为FJ540907.SmFBA的cDNA全长含有1 390个核苷酸,包含一个完整的1 065 bp的开放阅读框,编码355个氨基酸残基.SmFBA基因全长含有3个外显子和2个内含子.生物信息学分析显示SmFBA蛋白预测的等电点为5.60,预测的分子量为37.78 ku,和其他植物物种中果糖磷酸酶具有很高的序列同源性.用Southern杂交技术显示SmFBA在丹参基因组中呈低拷贝.该基因在丹参根、茎、叶等器官都表达,根中表达量最高.体外重组表达的SmFBA在大肠杆菌中具有酶活性,并且能够提高大肠杆菌的耐盐性.这项研究进一步拓展了人们对高等植物糖酵解途径的认识.谭何新,刘颖,张磊 - 药学实践杂志文章来源： 万方数据 -
荧光定量PCR和酶联免疫吸附技术在手足口病肠道病毒快速检测中的应用比较
目的:比较荧光定量PCR(FQ-PCR)和酶联免疫吸附技术(ELISA)在手足口病肠道病毒快速检测中的应用价值.方法:选取疑似手足口病患儿200例,采集咽拭子、粪便、疱疹液标本232份,进行FQ-PCR检测,同时采用ELISA进行平行检测,比较两者的阳性检出率、灵敏度与特异性以及检测窗口期.结果:应用FQ-PCR方法,咽拭子、粪便、疱疹液中EV71、CoxA16、通用型肠道病毒核酸RNA的总阳性检出率分别为84.83%、81.82%、85.71%,差异无统计学意义(F=0.79,P>0.05).FQ-PCR方法咽拭子、粪便、疱疹液阳性检出率均高于ELISA法对血液的阳性检出率(χ2=3.17~5.11,P<0.05).FQ-PCR、ELISA诊断灵敏度分别为97.03%、87.50%(χ2=3.98,P<0.05),诊断特异性分别为97.22%、88.68%(χ2=3.85,P<0.05).在EV71、CoxA16及通用型肠道病毒方面,FQ-PCR的检测窗口期均早于ELISA,差异有统计学意义(P<0.05).结论:FQ-PCR在手足口病肠道病毒快速检测方面优于ELISA,具有更高的阳性检出率、灵敏度与特异性,以及更早的检测窗口期,对手足口病的早期诊断具有较高的临床指导意义和推广应用价值.方静霞,沈丽萍,吴捍卫 - 儿科药学杂志文章来源： 万方数据 -
5个水稻品种对美国稻瘟病小种(IB-1,IE-1k,IG-1)的抗性遗传
为研究5个水稻品种对美国稻瘟病小种IB-1、IE-1k和IG-1的抗性遗传,于2008-2009年在美国阿肯色大学潘布拉夫分校和水稻研究推广中心,用中国水稻品种特青和4个美国水稻品种Katy、Mars、LaGrue和Newbonnet组成完全双列杂交.一代、杂交二代和亲本在温室,用美国稻瘟病(Magna porthegrisea)3个主要菌原小种IB-1、IE 1k和IG-1进行接种鉴定,进行完全双列杂交遗传分析研究.结果表明:特青抗所有的小种;Katy抗IB-1和IG-1,但感IE-1k; Mars抗IE-1k和IG-1,但感IB 1;LaGrue感所有小种;Newbonnet抗IG-1,但感IB-1和IE-1k.抗病品种特青与感病品种Newbonnet对小种IB-1,抗病品种特青与抗病品种Mars对IE-1k,抗病品种特青与抗病品种Katy,抗病品种特青与抗病品种Newbonnet对IG-1,其正反交二代抗病植株与感病植株的比例为63:1,说明,这些抗病品种对相应的IB-1、IE-1k和IG-1分别存在3对独立遗传的显性抗病基因,出现重叠作用的遗传关系.抗病品种特青与抗病品种Katy,抗病品种特青与感病品种LaGrue,抗病品种Katy与感病品种Newbonnet对IB-1,抗病品种特青与感病品种Mars 和感病品种Lagure,抗病品种Katy与感病品种Mars和感病品种Lagure对IG-1,其正反交杂交二代抗病植 株与感病植株的分离比例符合15:1的比例,说明,这些抗病品种对相应稻瘟病小种存在两对独立遗传的显 性抗性基因,出现重叠作用的遗传关系.抗病品种Mars与感病品种Katy、感病品种Lagure和感病品种Newbonnet对IE-1k,其杂交一代表现感病,正反交杂交二代抗病植株和感病植株的分离符合7抗:9感的比例,说明,品种Mars存在两对隐性抗病基因,感病品种Katy、Lagure和Newbonnet与抗病品种Mars的后代出现两对显性感病基因互补作用的遗传关系.抗病品种特青与感病品种Mars,抗病品种Katy与感病品种Mars及LaGrue对IB-1,抗病品种特青与感病品种Katy、LaGrue和Newbonnet对IE-1k,抗病品种Katy、Mars和Newbonnet与感病品种LaGrue对IG-1,其正反交二代的抗病植株与感病植株的比例为3:1,说明,这些品种对IB-1、IE-1k和IG-1的抗性分别存在1对显隐性基因遗传关系.感病品种Mars、La-Grue、Newbonnet对IB-1和感病品种Katy、LaGrue、Newbonnet对IE-1k,其正反交二代全为感病植株,说明,这些感病品种分别对IB-1、IE-1k的感病基因是等位的.HUANG Bi-hu, 严宗卜, 游俊梅 - 贵州农业科学文章来源： 万方数据 -
光电稳瞄二级稳定系统性能分析及测试
为了对控制系统稳定性能和扰动隔离能力进行分析,对二级稳定系统进行了建模和控制器设计,仿真结果显示,系统速率稳定回路带宽提升至200 Hz,1 Hz位置隔离度提升至-90.1 dB.在实际系统中,采用位置敏感探测器(PSD)测量瞄准线的运动,隔离度测试实验结果显示1 Hz位置隔离度提升至-73.1 dB,提升约20 dB,测试结果证明:二级稳定技术能够显著提高系统的稳定精度.胥青青,纪明,雷霏霖,徐飞飞,谭名栋,李红光 - 应用光学文章来源： 万方数据 -
针对MAG,OMgp,NogoA基因的scFv(OMgp)-9R-siRNA复合物的制备和鉴定
目的 运用抗体靶向技术联合siRNA形成双特异性复合物scFv-9R-siRNA的高效递送系统,该系统通过抗OMgp的scFv把MAG,OMgp和Nogo A的特异性siRNA特异性运输至受损神经细胞,从而抑制这三种轴突抑制物的表达,改善脊髓损伤后的局部微环境,阻断这些髓磷脂相关抑制物对轴突再生的抑制作用,为后续的大鼠模型试验奠定基础.方法 (1)根据基因重组技术,利用制备好的高效抗OMgp单克隆抗体构建单链抗体scFv(OMgp),并在此基础上非共价合成针对MAG,OMgp,NogoA基因的scFv (OMgp)-9R-siRNA复合物;(2)体外鉴定scFv (OMgp)-9R-siRNA复合物效果:鉴定MAG,OMgp,NogoA三种抑制物的mRNA和蛋白表达水平,同时与非神经细胞对比,研究引入scFv后所产生的靶细胞特异性.结果 (1)成功制备抗大鼠OMgp单克隆抗体E811,并通过ELISA和Western blot对已制备的抗大鼠OMgp单克隆抗体E811进行了特异性和敏感性鉴定,在此基础上成功获得scFv (OMgp)-9R-siRNA复合物;(2)体外实验证实:scFv (OMgp)-9R-siRNA复合物同时特异性下调MAG,OMgp和Nogo A基因表达.结论 单链抗体技术(scFv)解决了siRNA的特异性导入受损神经元问题,为体内应用siRNA技术治疗脊髓损伤奠定了基础.马建国,严望军,刘铁龙,肖建如,周许辉,贾连顺 - 实验动物与比较医学文章来源： 万方数据 -
重组结核分枝杆菌CFP10的克隆与表达
目的:克隆和表达结核分枝杆菌CFP10,并分析其免疫学活性.方法:自结核分枝杆菌标准株H37Rv提取基因组DNA,PCR扩增cfp10基因,克隆至T载体pMD18T,转化入大肠杆菌JM109,菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析.将测序正确的pMD18-cfp10的cfp10基因亚克隆至表达载体PQE30,构建重组质粒PQE30-cfp10,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,PCR和双酶切鉴定阳性重组体,IPTG诱导CFP10表达,亲和层析纯化,western-blot分析其免疫活性.结果:成功构建PQE30-cfp10重组表达质粒,表达、纯化获得分子量约10kDa的CFP10,并能被结核病人血清识别.结论:克隆表达获得具有免疫活性的重组结核分枝杆菌CFP10.杨双,袁仕善,谭云洪,邓志高,孙文霞,李民 - 湖南师范大学学报(医学版)文章来源： 万方数据 -
基于多组体纹理切片的草地场景快速仿真技术
高度真实感的草地场景仿真是计算机图形学和仿真领域具有挑战性的课题.传统的基于几何的方法能够表现草体丰富的细节,但是庞大的数据量对于实时仿真并不完全适用.基于图像的方法虽然大大提高了仿真效率,但是对细节的表现不足.基于体纹理的方法在表现结构复杂且具有重复性的场景方面具有优势.应用体纹理的算法,可以在保证一定场景真实感的前提下,提高仿真效率.结合可编程图形处理器(GPU)的技术,设计并实现了基于多组体纹理切片的草地场景快速仿真算法.利用光线投射法,分别得到三组单方向体纹理的绘制效果.再根据视线的方向,决定每组体纹理图像的贡献度,进行加权融合.实验结果表明,算法在保证较高真实感的前提下,实现了草地场景的实时仿真.邓玉,曹卫群,高阳,魏厚明,刘兴 - 系统仿真学报文章来源： 万方数据 -
毫秒级快速接触反应催化氧化乙烷的实验研究
以α-Al2O3为载体,采用浸渍法制备了Pt催化剂,考察了Pt催化条件下毫秒级快速重整C2H6的催化反应特性.通过测定重整反应过程中的温度分布情况,讨论了直接反应模型和间接反应模型.结果表明:混合气中燃氧摩尔比(r=n(C2H6)/n(O2))和反应进气中氮气体积分数(φ(N2))对产物的选择性产生重要影响,随着混合气中r和φ(N2)的提高,C2H4的选择性逐渐增大(最高达70%),H2和CO的选择性(S(H2)、S(CO))降低;混合气体积流量(qV)对产物的选择性也有明显影响,当qV=4L/min时S(H2)和S(CO)达到最高,分别为40%和75%;C2H6快速催化氧化的产物比例受到多相催化反应与气相反应共同作用.李拓年,林赫,罗韬,黄震 - 上海交通大学学报文章来源： 万方数据 -
年龄分层的血清N末端B型钠尿肽前体临界值预测重症监护病房病死率的研究
目的 探讨年龄分层的血清N末端B型钠尿肽前体(NT-proBNP)对重症监护病房(ICU)患者病死率的预测价值.方法 回顾性分析2011年1月至2012年10月顺序收入解放军第四○一医院ICU 295例患者的临床资料,根据年龄将患者分为<65岁组(105例)和≥65岁组(190例).记录患者入ICU 24 h内的血清NT-proBNP、红细胞比容(HCT)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、血肌酐(SCr)、肾小球滤过率(eGFR)、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分和存活概率(PS).以ICU病死率为预测终点.利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清NT-proBNP对预后预测的价值.结果 ①两组患者ICU住院时间,机械通气率,病死率,循环、消化、神经系统及术后患者比例,HCT、PCT、CRP比较差异均无统计学意义(均P>0.05).≥65岁组男性比例、APACHEⅡ评分、呼吸系统疾病患者比例、NT-proBNP明显高于<65岁组[男性比例:51.6%比33.0%,x2=9.093,P=0.003; APACHEⅡ评分(分):22.94±8.10比19.44±8.51,Z=-3.259,P=0.001;呼吸系统疾病患者比例:29.47%比17.14%,x2=5.472,P=0.024;NT-proBNP(ng/L):5 859.00(2 050.75,23 802.75)比2 882.00(275.15,6 236.00),Z=-5.514,P=0.000];而PS、多发伤和其他疾病患者比例及eGFR明显低于<65岁组[PS:59.0(31.5,79.0)%比70.0(40.0,84.0)%,Z=-3.431,P=0.001;多发伤患者比例:0.53%比17.14%,x2=30.987,P=0.000;其他疾病比例:5.79%比13.33%,x2=4.962,P=0.030;eGFR(mL·min-1·1.73 m-2):81.07(45.77,131.80)比95.54(33.64,165.55),Z=-2.214,P=0.027].②<65岁组NT-proBNP预测病死率的曲线下面积(AUC)[95%可信区间(95%CI)]明显大于≥65岁组及全体患者[0.825(0.738~0.892)比0.664(0.592~0.731)、0.725(0.670~0.775),Z1=-2.835,P1=0.005; Z2=-1.995,P2=0.046].③<65岁组NT-proBNP临界值(2 882 ng/L)的敏感度(76.10%比64.10%)、特异度(82.35%比67.12%)、阳性预测值(90.0%比75.8%)、阴性预测值(62.2%比53.8%)明显高于≥65岁组NT-proBNP临界值(6 062 ng/L).结论 危重病患者以不同年龄分层界定的NT-proBNP临界值评价病死率较为客观和准确.李海玲,王洪萍,娄云鹏,缪文丽,莎宁 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
基于金字塔模型的小样图快速搜索纹理合成算法
基于样图的纹理合成技术是当前计算机图形学、计算机视觉和图像处理领域的研究热点之一.文章提出基于金字塔型的小样图快速搜索算法,在合成速度上得到了很大的提升;同时还包含以误差为匹配标准,在纹理块之间进行了平滑处理的磨滑算法.实验结果表明,本算法在规则和随机纹理合成上都得到了不错的视觉效果.朱涛,俞晓明,沈音乐 - 煤炭技术文章来源： 万方数据
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