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环介导等温扩增技术在快速检测炭疽芽胞杆菌中的应用
本文旨在建立适合国境口岸现场应用的生物恐怖防控快速检测方法,从而保障口岸安全.针对生物恐怖炭疽芽胞杆菌,选择目标菌种特异性基因片段,设计引物,运用环介导等温扩增(LAMP)技术建立一套简便、高效的检测方法,并模拟生物恐怖炭疽芽胞杆菌可能存在的基质条件,评价LAMP技术在快速筛查中的适用性.结果显示,LAMP技术排查生物恐怖炭疽芽胞杆菌简便、快速、特异,检测灵敏度为102~103 CFU/ml;且能有效检出在偏酸、偏碱及黏稠基质中的炭疽芽胞杆菌.而高盐环境对该反应影响较大,有必要采用能有效去除盐分的核酸抽提方法.段圣亮,陆晔,田桢干,王桂江 - 微生物与感染文章来源： 万方数据 -
转录因子IRF8抑制Thl7细胞分化并减轻T细胞免疫介导的小鼠结肠炎
目的:转录因子干扰素调节因子(interferonregulatoryfactor,IRF)家族与Thl7的发育密切相关,近年来发现Thl7细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Thl7发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响.方法:(1)采用流式细胞术分选野生型(wT)或IRF8全基因敲除(IRF8.)小鼠脾脏和淋巴结的naiveCD4'T细胞(CIM'CD62L'CIM4""),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测n1、Th2和Thl7的比例.(2)建立实验性肠炎模型:采用免疫磁珠法分选wT或IRF8.一小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4'CD25'Treg,WT小鼠的CIM'CD45RB"T细胞单独或者分别联合wT或IRF8.小鼠的CIM'CD25'Treg腹腔注射给础凹.一小鼠;wr或侬咫.一小鼠的naiveCD4'CD45RB"T细胞腹腔注射给RAGl.一小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测.结果:(1)IRF8I/-较'WT的naiveCD4'T细胞在极化条件下向Thl7细胞分化更明显(P〈0.01),而对Thl和Th2细胞的分化无影响(P〉0.05).(2)CIM'CIM5RB"T细胞转染给RAGJ"-小鼠,侬F8.一较wr供体鼠引起的RAGl"一小鼠体重显著降低(P〈0.05),结肠炎评分显著增高(P〈0.05),且肠系膜淋巴结中IL-17'CD4'细胞比例明显增高(p〈0,01),而IFN-1,'CD4'和Foxp3'CD4'细胞比例无影响(P〉0.05);IRF8"一小鼠的CD4'CD25'Treg对wT小鼠CD4'CD45RB"T细胞转染给RAGl.一小鼠诱发的免疫介导的结肠炎显示出正常的免疫抑制作用.结论:转录因子鹏丹基因敲除促进CD4'T细胞向Thl7细胞分化,促进转染naiveCD4'T细胞诱导的实验性结肠炎的发牛.脶同基因敲除小鼠Treg细胞免疫抑制功能正常.李庆山,杜庆华,谢健晋,邓家德,余碧珍,江雪杰,孟凡义 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
基于荧光显色的IBV LAMP检测方法研究
【目的】建立基于荧光显色的可视化禽传染性支气管炎病毒（IBV）环介导等温扩增（LAMP）检测体系，为IBV的快速临床检测提供有力的技术支持。【方法】根据NCBI中收录的IBV 5a＋5b基因的8个区域设计了3对LAMP引物，通过对反应体系各组分和条件的优化，建立IBV LAMP检测方法，并对该方法的特异性和敏感性进行验证。分别用SYBR Green I和一定浓度比的钙黄绿素/锰离子混合物作为显色剂，对IBV LAMP检测结果进行可视化判定。应用该检测体系和PCR方法对临床送检的60份样品同时进行检测，比较2种方法的阳性检出率。【结果】成功建立了IBV LAMP检测方法，该方法能够在等温（63 ℃）条件下1 h内完成反应，具有良好的敏感性和特异性，最低可以检出1拷贝/μL的阳性重组质粒，比普通PCR方法敏感100倍，而对其他病毒检测结果均为阴性。应用SYBR Green I和钙黄绿素/锰离子显色时，阴阳性样品均有强烈的颜色对比，其中0.05 mmol/L钙黄绿素与0.6 mmol/L锰离子混合液可以用于LAMP扩增产物的判断，其结果与琼脂糖凝胶电泳结果一致。在对60份临床样本的检测中，LAMP和PCR方法检测出的阳性样本数量分别为49份和42份。【结论】建立了基于荧光显色的IBV LAMP检测方法，该方法具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力。张琳,马利,丁雅苓,逯茂洋,胡北侠,杨少华,张秀美 - 西北农林科技大学学报(自然科学版)文章来源： 万方数据 -
联合免疫抑制和无关供者造血干细胞移植治疗儿童重型再生障碍性贫血研究进展
儿童后天获得性特发性再生障碍性贫血(Aplastic anemia,AA)是儿童时期严重的血液病之一.我国属于AA高发区,年发病率十万分之二.近年研究显示T淋巴细胞免疫介导的造血干细胞(Hematopoietic stem cell,HSC)损伤是AA的重要发病机制之一.根据AA的免疫损伤机制而采用的免疫抑制治疗(Immunosuppressive therapy,IST)可明显改善AA患儿的预后.目前重型AA的主要治疗方法包括:同胞相合的造血干细胞移植(Matched sibling donor hematopoietic stem cell transplantation,MSD-HSCT)、免疫抑制治疗、无关供者造血干细胞移植(Unrelated donor hematopoietic stem cell transplantation,UD-王振龙,于洁 - 儿科药学杂志文章来源： 万方数据 -
细胞色素CYP2E1介导了代森锰和百草枯刺激诱导的血红素氧合酶1与谷胱甘肽硫转移酶的表达
细胞色素P4502E1(CYP2E1)、谷胱甘肽硫转移酶A4-4(GSTA4-4)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在代森锰及百草枯中毒引起机体的各器官损害中起重要作用.最近,印度学者进行了一项动物实验研究,旨在了解CYP2E1是否介导了代森锰和百草枯诱导的氧化应激反应及其具体机制.研究人员将大鼠随机分为代森锰组、百草枯组、代森锰+百草枯组和对照组,每组再分为3个亚组,分别给予CYP2E1抑制剂二基丙烯硫化物(DAS)、iNOS抑制剂氨基胍碳酸氢盐(AG)或对照治疗.罗红敏 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据
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