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SIRT1通过降低NF-KBp6S乙酰化减轻高糖应激引起的大鼠肾小球系膜细胞损伤
目的:研究沉默信息调节因子1(SIRTl)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞NF-KBv6s蛋白乙酰化影响及其保护作用.方法:培养大鼠肾小球系膜细胞,实验分为5组:正常对照组、甘露醇组、高糖组、白藜芦醇组和SIRTlRNAi组.MTT比色法检测细胞活性;以实时荧光定量PCR检测SIRT1、单核细胞趋化蛋白1(MCP.1)、血管黏附分子1(VCAM-1)、肿瘤坏死因子a(TNF-a)和转化生长因子9,(TGF-B1)mRNA水平;Westernblotting检测SIRTI和NF-KBp65乙酰化蛋白的表达水平,ELISA检测MCP.1、VCAM.1、TNF.仪、TGF.B1和丙二醛(MDA)的含量.结果:高糖刺激使肾小球系膜细胞的活力降低,超氧化物岐化酶(SOD)活性降低,MDA含量增加;SIRTlmR.NA及蛋白表达降低,NF-KBp65蛋白乙酰化水平增高,MCP-1、VCAM-1、TNF-a、TGF.B,mRNA和蛋白水平增高.白藜芦醇可逆转高糖引起的变化,而沉默SIRTI基因使高糖诱导的系膜细胞NF-KBp56乙酰化水平、MCP-1、VCAM-1、TNF-a、TGF-B1mRNA和蛋白水平升高.结论:高糖可降低SIRTl水平,增加炎症因子的表达.SIRTl的激活可使NF-KB的亚单位RelA/p65去乙酰化,从而抑制炎症因子的产生.SIRT1可作为治疗DN的潜在靶点.杜月光,柴可夫,钱俊文,章科娜 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
低氧诱导因子-1的病理生理及相关药物研究进展
低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factors, HIF-1)是介导哺乳动物和人体细胞低氧适应性反应的主要核转录因子,是专一调节氧稳态的关键物质。 HIF-1对胚胎的正常发育,软骨及骨的形成等多种生理过程起保护及促进作用,也与肿瘤、糖尿病及其并发症等多种缺血低氧性疾病密切相关。 HIF-1在这些疾病中的分子机制已成为目前的研究热点,笔者就HIF-1的结构特征、调控机制、生物学效用及在药物研发等方面进行综述。冯世杰,马秀娟,宗英,毛煜,张晓冬,弓雪莲,张晓芳,陆国才 - 药学实践杂志文章来源： 万方数据 -
MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡
目的:研究肌原纤维形成调节因子1 (MR-1)是否通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)途径减轻缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡.方法:在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用Annexin V/PI双标法检测心肌细胞的凋亡率;以Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化PERK、Nrf2、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、Bcl-2和Bax的蛋白水平,研究过表达或敲低对于H/R致心肌细胞凋亡的影响及其与PERK/Nrf2途径活化的关系.结果:H/R引起心肌细胞凋亡;过表达MR-1减轻H/R引起的细胞凋亡(P<0.01),下调CHOP表达(P<0.05),引起Bcl-2/Bax值升高(P<0.01),并抑制H/R诱导的PERK磷酸化、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01).敲低MR-1加重H/R引起的细胞凋亡(P<0.01)、CHOP表达上调(P<0.05)和Bcl-2/Bax值下降(P<0.01),并加重H/R诱导的PERK磷酸化(P<0.05)、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01).结论:MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径而减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡.陶天琪,王晓礽,徐菲菲,刘蜜,李玉珍,刘秀华 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
低氧诱导的小窝蛋白-1上调参与人肺腺癌细胞A549迁移和侵袭
目的:探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl2)对小窝蛋白-1(Cav-1)生成的调节作用及后者对人肺腺癌A549细胞迁移、侵袭的影响.方法:检测肺癌患者伴恶性胸水(MPE)和结核性胸膜炎患者胸水(TBPE)中Cav-1和缺氧诱导因子(HIF)-1α浓度,比较两者相关性;以CoCl2和(或)HIF-1α抑制剂YC-1作用于A549细胞ELISA法检测细胞上清Cav-1和HIF-1α浓度;分别采用细胞划痕实验及Transwell小室侵袭实验研究CoCl2刺激表达的Cav-1对A549细胞迁移和侵袭的影响.结果:MPE中Cav-1和HIF-1α浓度明显高于TBPE,两组患者胸水中Cav-1与HIF-1α均呈正相关.CoCl2浓度和时间依赖性诱导A549细胞Cav-1和HIF-1α生成,200μmol/L或24 h达到峰值;浓度>200μmol/L或作用时间超过24 h则呈现浓度或时间依赖性抑制.HIF-1α抑制剂YC-1浓度依赖性抑制HIF-1α和Cav-1生成.CoCl2浓度依赖性增强A549细胞迁移和侵袭,200μmol/L作用最强;YC-1对上述过程产生抑制效应.结论:肺癌患者胸腔积液中Cav-1浓度升高,低氧诱导Cav-1生成的变化可能参与了A549细胞迁移和侵袭,HIF-1α可能对Cav-1生成发挥影响.左蓓,刑敏,孙珍贵,汪向海,陈兴无 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
抗阻训练对心梗大鼠心肌Neuregulin-1的表征和心脏结构与功能的影响
目的:探讨抗阻训练对心梗(Myocardial Infarction ,MI)大鼠心肌组织中神经调节蛋白(Neuregulin-1,NRG1)及其信号通路表达的影响及其对心脏结构与功能的保护效应。方法:3月龄雄性SD大鼠,体重180~220 g ,随机分为假手术组(Sham )、心梗组(MI )和心梗抗阻训练组(MR),每组10只。MI和MR组结扎左冠脉前降支(LAD),建立 MI模型。其中 MR组于术后1周进行为期4周的抗阻训练,结束后测定心功能;采用石蜡切片和 HE、Masson染色技术观察并计算组织形态学变化和胶原容积分数(Collagen volume fraction ,CVF ),采用免疫组化、Real Time-qPCR和Western Blotting 技术检测心肌血管新生、细胞凋亡等相关蛋白α-SMA、CD105、BCL-2和Bax以及NRG1及其受体ErbB2/4和下游信号通路蛋白的表达变化。结果:抗阻训练有效提升了 MI大鼠心功能,改善心肌细胞病理性肥大;促进非梗死区心肌α-SMA和CD105表达、显著升高BCL-2/Bax 比值;显著增加 MI大鼠心肌 NRG1蛋白的表达和erbb2 mRNA表达,升高 PI3K-Akt和ERK1/2的磷酸化水平。结论:本研究发现,抗阻训练可改善 MI心脏的病理性重塑,促进非梗死区血管新生,抑制心肌细胞凋亡,安全有效的改善 MI心脏的功能;抗阻训练可促进心肌 NRG1及其 ErbBs的表达,其心脏的保护效应与心肌NRG1/ErbBs及PI3K/Akt和ERK1/2信号通路激活有关。蔡梦昕,王庆安,田振军 - 体育科学文章来源： 万方数据 -
AIRE基因与重症肌无力、胸腺瘤关系的研究进展
自身免疫调节因子( autoimmune regulator, AIRE)是一种具有转录活化潜能的结合蛋白,该基因在生理状态之下可能对维持自身免疫耐受起关键作用。重症肌无力患者中有75%胸腺异常,其中15%表现为胸腺瘤。95%胸腺瘤中AIRE基因表达缺失,该文对AIRE基因、重症肌无力及胸腺瘤之间的关系作一综述。郑神英,田云霄 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
Sp3对β-catenin基因转录调控作用初探
目的:观察转录因子Sp3对β-catenin启动子转录活性的影响,探讨Sp3与Wnt/β-catenin信号通路的关系.方法:采用脂质体法将Sp1和(或)Sp3转录因子表达质粒单独/共同与β-catenin启动子(-410/-1bp)报告基因质粒瞬时转染HEK293T细胞;通过双萤光素酶报告基因实验检测报告基因转录活性的变化.结果:(1)Sp1表达质粒在0.4μg剂量时能提高启动子的活性2.4倍,Sp3表达质粒在0.4μg剂量时能显著提高启动子的活性5.3倍.(2)0.4μg总量的Sp1与Sp3表达质粒共转染293T细胞,随着Sp3/Sp1比例的递增,β-catenin启动子转录活性无明显变化.(3)共同转染Sp1 0.3μg与Sp3 0.1μg时,启动子活性提高3.5倍,比单独转染的转录活性强.结论:Sp3能促进β-catenin基因启动子(-410/-1 bp)的转录,Sp1的转录激活作用则较弱;在转录过程中Sp1和Sp3可能存在协同作用;Sp3可能在转录水平调控β-catenin的表达从而影响Wnt/β-catenin信号通路.黄兰姗,黄子凌,冯振博,陈罡,危丹明 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
GRP78在胃癌生长中的作用
目的:探讨内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78( GRP78)参与胃癌细胞生长的作用。方法:回顾性分析34例胃癌及34例癌旁组织,利用组织微阵列技术,构建组织阵列,采用免疫组织化学技术SP法检测该阵列中GRP78蛋白在胃癌及其癌旁组织中表达情况。利用Western blotting 检测人体胃癌组织、癌旁组织(肿瘤旁1 cm处)和正常组织(远离肿瘤≥10 cm 处)中GRP78蛋白的表达情况。利用Western blotting 检测人胃癌细胞SGC7901和过表达GRP78的SGC7901-H78细胞(稳定转染GRP78)中GRP78和生长相关蛋白cyclin D1的表达情况。结果:(1)免疫组织化学检测发现:人体胃癌组织中GRP78表达水平明显高于癌旁组织和正常组织,且与性别、分化程度相关(P<0.05);(2) Western blotting检测发现:胃癌组织中GRP78蛋白的表达明显高于癌旁组织和正常组织;(3) Western blotting检测发现:相对于SGC7901细胞,SGC7901-H78细胞中GRP78蛋白的表达明显升高,同时检测生长相关蛋白cyclin D1的表达发现,随着GRP78表达的上调,cyclin D1蛋白表达增加。结论:GRP78蛋白的高表达可能参与了胃癌细胞的生长。付政祺,镇鸿燕,刘丽江 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
转录因子IRF8抑制Thl7细胞分化并减轻T细胞免疫介导的小鼠结肠炎
目的:转录因子干扰素调节因子(interferonregulatoryfactor,IRF)家族与Thl7的发育密切相关,近年来发现Thl7细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Thl7发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响.方法:(1)采用流式细胞术分选野生型(wT)或IRF8全基因敲除(IRF8.)小鼠脾脏和淋巴结的naiveCD4'T细胞(CIM'CD62L'CIM4""),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测n1、Th2和Thl7的比例.(2)建立实验性肠炎模型:采用免疫磁珠法分选wT或IRF8.一小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4'CD25'Treg,WT小鼠的CIM'CD45RB"T细胞单独或者分别联合wT或IRF8.小鼠的CIM'CD25'Treg腹腔注射给础凹.一小鼠;wr或侬咫.一小鼠的naiveCD4'CD45RB"T细胞腹腔注射给RAGl.一小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测.结果:(1)IRF8I/-较'WT的naiveCD4'T细胞在极化条件下向Thl7细胞分化更明显(P〈0.01),而对Thl和Th2细胞的分化无影响(P〉0.05).(2)CIM'CIM5RB"T细胞转染给RAGJ"-小鼠,侬F8.一较wr供体鼠引起的RAGl"一小鼠体重显著降低(P〈0.05),结肠炎评分显著增高(P〈0.05),且肠系膜淋巴结中IL-17'CD4'细胞比例明显增高(p〈0,01),而IFN-1,'CD4'和Foxp3'CD4'细胞比例无影响(P〉0.05);IRF8"一小鼠的CD4'CD25'Treg对wT小鼠CD4'CD45RB"T细胞转染给RAGl.一小鼠诱发的免疫介导的结肠炎显示出正常的免疫抑制作用.结论:转录因子鹏丹基因敲除促进CD4'T细胞向Thl7细胞分化,促进转染naiveCD4'T细胞诱导的实验性结肠炎的发牛.脶同基因敲除小鼠Treg细胞免疫抑制功能正常.李庆山,杜庆华,谢健晋,邓家德,余碧珍,江雪杰,孟凡义 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
微小RNA-146a调控肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1和肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达
目的 观察转染微小RNR-146a(miR-146a)对肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)表达的影响,为探讨miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控机制奠定基础.方法 将体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为miR-146a模拟物(mimic)组和阴性对照组,分别加入50 nmol/L Pre-miR miR-146a前体和Cy3标记的Pre-miR阴性对照进行转染,转染24 h后收集细胞,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-146a、IRAK-1 mRNA、TRAF-6mRNA的表达,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达.结果 miR-146amimic组miR-146a表达较阴性对照组上调了(24.55±6.14)倍(t=-6.643,P=0.003).细胞中IRAK-1和TRAF-6的mRNA表达分别为阴性对照组的(1.16±0.10)倍(t=2.701,P=0.054)和(1.19±0.16)倍(t=2.032,P=0.112).而IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达分别为阴性对照组的73.0%(t=-9.353,P=0.001)和64.1%(t=-6.839,P=0.002).结论 miR-146a mimic能成功转染肺泡巨噬细胞NR8383; miR-146a过表达后,能有效下调肺泡巨噬细胞中IRAK-1和TRAF-6的表达,其机制可能是在蛋白翻译水平的抑制.黄萍,刘芬,曾振国,黄彩雪,邵强,夏亮,揭克敏,钱克俭 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据
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