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三种慢性胰腺炎大鼠模型的观察与比较
目的 观察与比较雨蛙素注射、胰胆管结扎及精氨酸注射三种慢性胰腺炎造模方法.方法 将大鼠随机分入雨蛙素注射(Cerulein)组,胰胆管结扎(Ligation)组,精氨酸注射组(Arginine).采取相应方法制作慢性胰腺炎动物模型,在造模后3d、7d、14d三个时间点检测血淀粉酶、丙氨酸氨基转氨酶、血糖水平,ELISA法检测血清TNF-a,IL-1b水平,获取胰腺组织标本,对胰腺水肿、炎症、出血、腺泡坏死进行病理评分,应用Van Gieson染色法对胰腺胶原纤维染色.RT-PCR法检测TGF-b表达.结果 造模后各时间点,各组丙氨酸氨基转氨酶、血糖、TNF-a、IL-1b水平无明显差异,注射后3d,Cerulein组胰腺病理评分明显低于Ligation组和Arginine组.三组均可见胰腺组织胶原染色.Cerulein组3d时TGF-b表达低于Ligation组.结论 三种造模方法各有优劣,但精氨酸注射法简便易行.赵航,黄丹丹,董育玮,张汝玲,周慧 - 实验动物与比较医学文章来源： 万方数据 -
SRSF2基因突变与髓系肿瘤
近年随着新一代基因组测序技术的开展,发现剪接体相关基因突变在髓系肿瘤中检出率较高,并且可能与疾病的发生发展密切相关.研究这些基因突变前后功能的改变不仅有助于明确疾病的发病机制,而且对于疾病的诊断、治疗及预后判断也具有重要意义.富含丝氨酸/精氨酸剪接因子2(serine/arginine-rich splicing factor 2,SRSF2)基因是常见剪接体基因突变之一,对mRNA的剪接、转录和维持DNA苗宁宁,孟凡凯,曾雯,秦爽,罗丹,孙汉英 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
HPLC法同时测定人血清中犬尿氨酸和色氨酸的浓度
目的:建立同时测定人血清中的犬尿氨酸和色氨酸浓度的方法.方法:血清样品用24%高氯酸以10:1进行蛋白沉淀处理,取上清液进样分析.采用高效液相色谱-紫外/荧光检测器法分别检测犬尿氨酸和色氨酸浓度,色谱柱为Accurasil-C18,流动相为乙酸钠-乙腈溶液(24.8mmol.L-1乙酸钠,用乙酸调pH值至约4.0)=90:10,流速1.0mL.min-1,紫外检测波长为360nm,荧光检测激发波长为285nm、发射波长为365nm.结果:犬尿氨酸、色氨酸血药浓度分别在0.16~20.89(r=0.9999)、0.24~61.58μmol.L-1(r=0.9996)范围线性关系良好;高、中、低3种浓度的方法回收率分别为91.33%~101.82%、91.49%~104.37%;日内及日间RSD均唐婕,陈蓉,缪丽燕 - 中国药房文章来源： 万方数据 -
体温控制对重型颅脑损伤患者脑脊液中caspase-3、caspase-9及预后的影响
目的 探讨体温控制对重型颅脑损伤患者神经细胞凋亡及预后的影响. 方法 将42例重型颅脑损伤患者随机分为两组:实验组(n=22)患者采用亚低温治疗仪将患者急性期7d内的肛温持续控制在36℃ ~37℃;对照组(n=20)未控制体温,当体温超38℃时予常规方法降低体温.收集患者入院后第1、3、5、7d的脑脊液标本,比较两组患者脑脊液中caspase-3、caspase-9的浓度及预后的差异. 结果 ①组间比较,caspase-3及caspase-9的浓度值均在第1d无统计学差异(P>0.05);实验组第3、5及7d浓度均低于对照组(P<0.05).②根据伤后3~6个月GOS评分,实验组患者预后良好率高于对照组(P<0.05). 结论 体温控制在36℃~37℃可降低重型颅脑损伤患者脑脊液中caspase-3及caspase-9的浓度,降低预后不良的发生率,改善患者的预后.袁辉纯,徐立新,刘志雄,贾若飞,阙思伟,冷海斌,王俊,梅涛 - 中国现代手术学杂志文章来源： 万方数据 -
转录因子 ZFP580在缺氧预处理抗大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
目的:通过观察缺氧预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及锌指核转录因子ZFP580表达的改变,探讨ZFP580的作用及机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,分为3组:(1)缺氧/复氧(H/R)组:H9c2心肌细胞换用模拟缺血溶液(pH=6.2)缺氧(95%N2+5%CO2)培养3 h,复氧培养2 h;(2)缺氧预适应(HPC)组:H9c2心肌细胞经3个循环的短暂缺氧(10 min)/复氧(20 min)处理后,进行同上H/R实验;(3)对照(C)组:正常培养的H9c2心肌细胞。通过MTT染色及LDH水平判定HPC的作用。 Western blotting方法观察心肌细胞中转录因子ZFP580表达及ERK1/2磷酸化情况,以及ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059对ZFP580表达的影响。分别构建高/低表达ZFP580的慢病毒载体并转染H9c2心肌细胞,经H/R实验后利用Annexin V-PE/7-AAD染色及流式细胞术检测H9c2细胞凋亡情况,Western bloting方法观察caspase-3活化情况。结果: HPC能显著改善H/R处理后H9c2心肌细胞存活率降低和LDH漏出的现象。 Western blotting 结果显示,HPC组心肌细胞中ZFP580表达及ERK1/2磷酸化程度较H/R处理组明显上升,且PD98059预处理明显抑制HPC诱导的ZFP580的表达上调。慢病毒介导的基因转染实验发现,ZFP580高表达的H9c2心肌细胞在H/R损伤后凋亡率降低且细胞中活化caspase-3表达下降。结论:HPC可引起心肌细胞中转录因子ZFP580表达上调,ZFP580作为ERK1/2通路的下游靶分子发挥抗心肌细胞凋亡的作用。 ZFP580表达上调可能作为内源性保护机制之一介导了HPC的细胞保护作用。孟祥艳,于海龙,买霞,张文成,徐瑞成 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
苦参碱对人髓母细胞瘤 D341细胞凋亡及相关蛋白表达的影响
目的:探讨苦参碱在体外对人髓母细胞瘤D341细胞凋亡及Bax、Bcl-2、丝氨酸/苏氨酸激酶Akt和磷酸化Akt(p-Akt)表达的影响。方法:体外培养的D341细胞分为实验组(加不同浓度的苦参碱)和对照组(不加苦参碱),用CCK-8法检测苦参碱对D341细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot-ting检测苦参碱对D341细胞Bax、Bcl-2、Akt和p-Akt蛋白表达的影响。结果:苦参碱在体外能明显地抑制D341细胞的生长,作用呈量效与时效关系;随着作用药物浓度的增高和作用时间的延长,其凋亡率逐渐升高,在透射电镜下观察,细胞可见染色质趋边固缩,胞浆中空泡增多、变大,并且出现凋亡小体;Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加,药物能使瘤细胞Bax蛋白的表达水平增强,却使Bcl-2和p-Akt蛋白的表达水平下降。结论:苦参碱可诱导D341细胞的凋亡而发挥体外抗肿瘤作用,其诱导瘤细胞的凋亡与上调Bax蛋白、下调Bcl-2及PI3K /Akt信号通路中p-Akt蛋白的表达水平有关。周开宇,毛天明,陈茜,罗永康 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
同型半胱氨酸在脑梗死患者中的表达及叶酸对其影响的研究
近年来随着我国人口老龄化的到来及人们生活水平的提高、生活方式的改变,脑梗死的发病率越来越高,是造成人类死亡及致残的重要原因之一,给社会及家庭带来沉重的经济及心理负担.大量研究表明同型半胱氨酸(Hcy)是脑梗死的重要独立危险因苗青,杨菲,戚静 - 临床荟萃文章来源： 万方数据 -
靶向 caspase-8小发夹 RNA 减轻去血清/缺氧诱导的人骨髓间充质干细胞凋亡
目的:研究caspase-8小发夹RNA(Cap8 shRNA)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)凋亡的调控作用。方法:构建2个靶向人caspase-8基因的穿梭质粒pAd-Cap8 shRNA,并鉴定可有效抑制人HEK293细胞中caspase-8表达的pAd-Cap8 shRNA质粒。构建表达Cap8 shRNA的重组腺病毒质粒,并在HEK293细胞中包装、扩增重组腺病毒rAd-Cap8 shRNA。检测rAd-Cap8 shRNA感染的hMSCs中caspase-8 mRNA和蛋白表达。利用anne-xin V/PI双染色法和caspase-8活性检测分析去血清/缺氧诱导的hMSCs凋亡变化,利用荧光定量PCR检测hMSCs中VEGF、肝细胞生长因子1(HGF)、胰岛素样生长因子(IGF-1)、Bcl-2和Bcl-xL mRNA表达。结果:通过定量PCR筛选到可有效抑制caspase-8表达的pAd-Cap8 shRNA质粒。成功构建Cap8 shRNA的重组腺病毒质粒,并包装、扩增重组腺病毒rAd-Cap8 shRNA。荧光定量PCR和Western blotting结果证实rAd-Cap8 shRNA可有效抑制hMSCs中caspase-8表达。 rAd-Cap8 shRNA能有效抑制去血清/缺氧诱导的hMSCs凋亡,降低caspase-8活性,增强hMSCs中HGF、IGF-1和Bcl-2表达。结论:Caspase-8 shRNA可以抑制去血清/缺氧诱导的hMSCs凋亡。袁伟伟,林秋雄,朱杰宁,李晓红,符永恒,刘晓颖,谭虹虹,邓春玉,单志新 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
越桔原花青素调控脑胶质瘤细胞生长的机制研究
目的:探讨越桔原花青素对脑胶质瘤细胞生长的影响。方法:培养脑胶质瘤C6细胞,将其分为对照组以及10、20和40μg/L越桔原花青素组,MTT法检测药物对C6细胞生长的影响,倒置显微镜观察细胞生长的变化,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡率的变化,免疫细胞化学法检测Bcl-2与Bax蛋白表达,Western blotting 检测Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达。结果:在24、48和72 h时,10、20和40μg/L越桔原花青素均抑制C6细胞的生长,24和48 h 时40μg/L 越桔原花青素组、72 h 时20和40μg/L 越桔原花青素组细胞生长明显受抑制(均P<0.01);倒置显微镜观察发现,各药物组细胞密度随药物浓度升高而减少;Annexin V/PI分析显示,细胞的凋亡率亦随着药物浓度的增加而明显增加;细胞免疫组化结果显示,10、20和40μg/L越桔原花青素组中,C6细胞表达Bcl-2蛋白减少,表达Bax蛋白增加,但均无明显差异;Bax/Bcl-2的比值随着药物浓度升高而增加( P<0.05或P<0.01);Western blotting结果显示,10、20和40μg/L越桔原花青素组中,随着药物浓度升高,细胞表达Bcl-2蛋白减少(P<0.01)而Bax和caspase-3蛋白表达均增加,Bax/Bcl-2的比值也明显增加(P<0.01)。结论:越桔原花青素抑制脑胶质瘤C6细胞的生长,其作用机制与调控Bax蛋白增加和Bcl-2蛋白减少,使Bax/Bcl-2比值增加,从而激活caspase-3,诱导凋亡发生有关。钟越,齐玲,沈楠,王玮瑶,田晶,王艳春 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
丙戊酸对致死性烫伤大鼠心肌的保护作用及机制研究
目的 研究丙戊酸(VPA)对致死性烫伤大鼠心肌的保护作用及机制.方法 78只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假烫组(n=10)、假烫+VPA组(n=10)、烫伤组(n=29)、烫伤+VPA组(n=29)4组.采用80℃水浴浸泡背部15s、双下肢15s、腹部8s造成55%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤大鼠模型;假烫组用37℃水浴浸泡,部位和时间与烫伤组相同.烫伤(假烫)后即刻皮下注射VPA300 mg/kg或等体积生理盐水(作为对照).各组分别于烫伤后6h取5只大鼠腹主动脉血,测定血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;然后处死动物取心肌组织,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测心肌细胞中组蛋白乙酰化水平及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活化水平;各组余下大鼠观察12h生存情况.结果 与假烫组相比,烫伤组大鼠伤后6h血浆CK-MB水平明显升高(U/L:5 438.0±413.6比2 881.0±324.8,P<0.05),心肌组蛋白3第9位乙酰化的赖氨酸(Ac-H3K9)水平明显降低(灰度值:0.55±0.18比1.00±0.20,P<0.05),心肌caspase-3活化水平明显增高(灰度值:1.75±0.25比1.00±0.18,P< 0.05);而给予VPA处理后能明显降低血浆CK-MB水平[(4018.0±388.3) U/L],明显升高心肌Ac-H3K9水平(灰度值:2.20±0.23),明显降低心肌caspase-3活化水平(灰度值:1.33±0.20),与烫伤组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).Kaplan-Meier生存曲线分析发现,VPA能显著延长大鼠烫伤后存活时间,12h时大鼠存活率可由0升高至50%(P<0.05).结论 VPA能改善致死性烫伤休克大鼠心肌酶学指标并延长其存活时间,其机制可能与其对组蛋白去乙酰化酶及caspase-3的抑制作用有关.罗红敏,胡森,白慧颖,王海滨,杜明华,林志龙,马丽,王欢,吕艺 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据
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