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甘氨双唑钠协同顺铂有效促进肺腺癌细胞中p21表达
目的:探讨甘氨双唑钠(CMNa)协同顺铂对肺腺癌细胞中p21表达的影响及其分子机制.方法:使用NCBI公共数据库分析顺铂对人肺腺癌细胞作用的mRNA芯片数据,寻找差异基因;对人肺腺癌A549细胞系用CMNa和顺铂处理,用real-time PCR技术验证A549细胞系差异基因的表达;用RT-PCR及染色质免疫沉淀技术进一步检测CMNa对p21及其上游分子p53表达的影响.结果:通过参考公共数据库中顺铂处理A549细胞系的mRNA芯片数据,对若干差异表达基因进行实验验证,发现p21受顺铂影响最为显著;CMNa联合顺铂处理可以有效促进A549细胞系p21的表达,但对A549细胞系单纯进行CMNa处理,p21无明显变化.此外,通过染色质免疫沉淀检测发现,CMNa联合顺铂处理可增加上游分子p53的表达,从而引起p21的上调.结论:CMNa可以协同顺铂上调p53表达,从而促进人肺腺癌细胞p21的表达,这提示CMNa对肺腺癌细胞的放疗增敏作用可能还有新的作用机制.廖小方,赵中洪,郭绍文,彭政,朱小平,王燕,邹燕,胡伟 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
下调 p21活化蛋白激酶2表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:应用RNA干扰技术下调人乳腺癌MCF-7细胞中p21活化蛋白激酶2( PAK2)的表达,观察其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建针对PAK2基因的短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体并包装病毒颗粒,感染MCF-7细胞,筛选获得稳定细胞株。 Western blotting检测细胞中PAK2蛋白表达水平的改变;CellTiter 96 AQueous法和软琼脂集落形成实验检测MCF-7细胞体外增殖能力的改变;流式细胞术检测十字孢碱诱导的MCF-7细胞凋亡的变化。结果:MCF-7细胞的PAK2基因被沉默后,PAK2蛋白表达量明显下降(P<0.01),与阴性对照组相比,sh-PAK2组细胞生长明显减缓(P<0.01),克隆形成的数目和大小明显下降(P<0.01),十字孢碱诱导的细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论:通过RNA干扰技术下调PAK2的表达,可抑制MCF-7细胞的生长和增殖,并增强其对化疗药物诱导的细胞凋亡的敏感性。 PAK2可能是潜在的乳腺癌治疗的新靶点。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
肝细胞癌中p21活化蛋白激酶6的表达及意义
目的 探讨p21活化蛋白激酶(p21-activated protein kinase,PAK)6在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其意义.方法 采用Western blot技术检测8例HCC及对应癌旁正常组织中PAK6的表达,运用免疫组化SP法检测121例HCC组织及癌旁组织中PAK6的表达.结果 Western blot及免疫组化分析显示,PAK6在HCC组织中的表达明显高于对应癌旁组织.HCC中PAK6表达与HCC的Edmondson-steiner组织学分级和肿瘤结节数之间差异有统计学意义,PAK6表达与增殖指标Ki-67呈正相关(P<0.01).Kaplan-Meier生存曲线分析表明,高表达PAK6的HCC患者总生存率和无病生存率均显著降低(P均<0.001).单因素生存分析表明,PAK6的高表达与HCC患者预后不良有关(P<0.001).COX危险比例模型多因素分析显示,PAK6和Ki-67、肿瘤Edmondson-steiner分级、转移、肿瘤大小、肿瘤数目可作为HCC患者预后的独立指标.结论 PAK6在HCC组织中明显高表达,可作为HCC患者独立的预后指标,PAK6可能与肝癌的发生、发展密切相关.陈宏伟,王春华,李军良,朱勇,王建新,吴侠 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
p21活化激酶6削弱非小细胞肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的分子机制水
目的:探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与非小细胞肺癌侵袭及迁移的关系,并了解PAK6下游分子信号机制.方法:通过生物信息学数据库预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Westernblotting及实时定量荧光PCR(real-timePea)检测A549细胞中PAK6的表达量,萤光素报告酶实验检测预测miRNA对以肠的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响.转染目标miRNA及siPAK6,Westernblotting检测A549细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达量.结果:生物信息学预测miR-23a可能是调控烈跖的靶向miRNA.Westernblotting检测转染miR-23a组PAK6表达量下降69%,而转染miR-23a抑制剂组PAK6表达量上升52%,差异均有统计学意义.萤光素报告酶实验结果显示,转染miR-23a后野生型PAK6组萤光素酶活性下降52%,而突变组差异无统计学意义(P〉0.05).Real.timePCR检测3组PAK6mRNA的表达差异无统计学意义(P〉0.05).体外迁移及侵袭实验示,转染miR-23a组迁移细胞数减少73%,侵袭的细胞数减少59%.Westernblotting检测发现,转染siPAK6组MMP-9的表达下降85%(P〈0.01),转染miR-23a组MMP-9的表达下降76%(P〈0.01).结论:miR-23a通过PAK6.MMP-9信号途径引起非小细胞肺癌细胞迁移及侵袭能力的下降.蔡松旺,李冬霞,安军,张军航 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
卵巢黏液性交界性肿瘤中K-ras基因突变及p21 ras蛋白的表达
目的:观察卵巢黏液性交界性肿瘤中K-ras基因突变及p21 ras蛋白的表达,探讨卵巢黏液性交界性肿瘤的发病机制及靶基因治疗的可能。方法采用PCR-RFLP法和免疫组化EliVision法分别检测40例卵巢黏液性交界性囊腺瘤、40例卵巢黏液性囊腺癌和20例卵巢黏液性囊腺瘤中K-ras基因突变和p21 ras蛋白的表达。结果 K-ras基因在卵巢黏液性囊腺瘤、黏液性交界性囊腺瘤和黏液性囊腺癌中的突变率分别为0、37.5%、7.5%,交界组突变率明显高于其他两组,差异有统计学意义( P<0.01)。 K-ras基因突变在卵巢黏液性交界性肿瘤年龄分组中突变,差异有统计学意义(P<0.05)。 p21ras蛋白在卵巢黏液性囊腺瘤、黏液性交界性囊腺瘤和黏液性囊腺癌中阳性率分别为5%、45%、10%,交界组阳性率明显高于其他两组,差异有统计学意义(P <0.01)。结论 K-ras基因突变及p21ras蛋白表达可能是卵巢黏液性交界性肿瘤形成的原因之一,有利于卵巢黏液性交界性肿瘤的判断,还可为临床作为靶向治疗药物分析提供病理学基础。叶璐,揭由坤,揭由琴,于晓红 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
hsa-miR-21-5p靶基因预测及其在急性肾损伤中的调控机制
目的:对hsa-miR-21-5p进行靶基因预测及生物信息学分析,为验证hsa-miR-21-5p靶基因及进一步研究hsa-miR-21-5p在急性肾损伤(AKI)中的调控作用提供数据支持.方法:应用Pubmed、Google等检索工具,以miR-21和AKI为关键词,检索miR-21与AKI相关的所有文献;应用miRBase获取各物种miR-21-5p序列,分析保守性;利用miRecord数据库进行靶基因预测,选取PicTar、PITA、RNAhybrid和TargetScan预测靶基因交集和DIANA LAB-TarBase 6.0已有实验数据支持的hsa-miR-21-5p靶基因作为研究的基因集合,进行功能注释、功能富集性分析(GO-analysis)及信号转导通路富集性分析.结果:miR-21水平在AKI肾脏、血及尿中均升高.miR-21-5p在多物种间具有序列保守性.hsa-miR-21-5p预测靶基因富集于生长发育、物质代谢与合成、细胞运动、细胞周期、增殖、凋亡、分化等生物学过程及蛋白连接、转录因子活性、转移酶活性、染色质结合、核苷酸结合、核苷结合、核酸结合、转录激活活性、连接酶活性等分子功能上,存在于胞内细胞器、细胞器界膜、细胞器组分、蛋白复合体、非膜性细胞器、细胞器管腔、极性生长位点等细胞组分中.预测靶基因富集于P53、TGF-β、细胞周期、MAPK、腺癌、膀胱癌、癌症通路、小细胞肺癌、慢性粒细胞白血病、黑色素瘤、前列腺癌、脑胶质瘤、大肠癌、非小细胞肺癌、子宫内膜癌、肌萎缩性侧索硬化症共16条通路中.结论:(1)miR-21水平在AKI肾脏、血及尿中均升高,对AKI有保护作用;(2)miR-21-5p在多物种间具有高度保守性;(3)hsa-miR-21-5p参与了多种生理、病理过程;(4)hsa-miR-21-5p对多条通路具有调控作用,可能通过调节细胞凋亡、炎症反应等参与AKI病理生理过程.邓旭,李志辉 - 儿科药学杂志文章来源： 万方数据 -
p110δ突变失活上调血管MMPs表达并引发血管壁结构损伤
目的:研究p110δD910A基因突变失活(p110δ-mutant)对动脉血管结构的影响及机制.方法:选取8周龄雄性的野生型(WT)小鼠与p110δ-mutant小鼠(n=20;20~25 g),取胸主动脉进行石蜡包埋,HE染色,采用免疫组化、免疫荧光以及real-time PCR等方法,研究p110δ突变对小鼠动脉血管形态变化的影响及机制.结果:与WT相比,p110δ突变失活后小鼠主动脉血管壁变薄,管腔变大.p110δ突变失活后主动脉血管壁形态紊乱,弹力纤维局部断裂,血管中内皮细胞凋亡.p110δ突变失活后主动脉血管α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量、胶原Ⅰ和胶原Ⅳ含量减少.p110δ突变失活后主动脉血管中的基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和MMP-9的mRNA水平明显升高.结论:PI3K活性在维持小鼠动脉血管的正常形态中起重要作用,p110δ突变失活后可能通过上调基质金属蛋白酶的表达促进血管壁结构的破坏.邢丽英,郑凌云,吴玉娥,曾翠玲,桂亚丽,方海燕,吴腾,王丽京,李卫东 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
环孢菌素D衍生物PSC833逆转K562/DOX细胞的凋亡抗性及其机制
目的:研究环孢菌素D衍生物PSC833对K562/DOX细胞多药耐药的逆转作用.方法:MTT法进行阿霉素(doxorubicin,DOX)和长春新碱(vincristine,VCR)的细胞毒测定;流式细胞术测定细胞周期;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;活性氧测定以DCFH-DA标记,线粒体跨膜电位测定用JC-1标记,细胞内钙测定用Fluo-3/AM标记,均以流式细胞术检测;Western blotting法测定细胞色素C(Cyt C)、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达.结果:环孢菌素D衍生物PSC833能显著增强DOX/VCR的细胞毒作用,使细胞阻滞在G2/M期;通过降低线粒体膜电位,升高细胞内活性氧和Ca2+水平,释放Cyt C、下调Bcl-2、上调Bax、激活cleaved caspase-3,增加DOX诱导的耐药细胞凋亡.结论:PSC833与DOX合用后,可阻滞细胞周期于G2/M期,通过线粒体通路诱导K562/DOX细胞凋亡.刘玲,王建刚,李艳,王淑英 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
上/下调 miR-21对结肠癌细胞的生物学作用及对西妥昔单抗药物敏感性的影响
目的:探讨miR-21在结肠癌细胞中的生物学功能及对EGFR单抗西妥昔敏感性的影响。方法:通过慢病毒载体的构建及包装生成上调/下调miR-21的慢病毒LV-miR-21和LV-anti-miR-21并感染人结肠癌RKO细胞,采用qRT-PCR、MTT、非锚定依赖性细胞生长、流式细胞术、CCK-8等技术检测上调/下调miR-21后细胞的miR-21表达水平、细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡能力及对西妥昔单抗药物敏感性的变化。结果: LV-miR-21与LV-anti-miR-21慢病毒的滴度分别为3.0×1012 TU/L和2.0×1012 TU/L,将病毒颗粒分别感染人结肠癌RKO细胞,观察绿色荧光,感染效率在80%以上。 LV-miR-21组的miR-21表达水平、细胞增殖能力和克隆形成能力均高于LV-anti-miR-21组,差异有统计学意义(P<0.05)。而LV-anti-miR-21组的细胞早期凋亡率及西妥昔单抗对细胞的抑制率均高于LV-miR-21组(P<0.05)。结论:miR-21可促进结肠肿瘤细胞的增殖。下调miR-21可以增加结肠癌细胞对靶向治疗药物西妥昔单抗的敏感性。巩波,李东风,谢子钧,段伊帆,李子俊 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
乳腺癌中磷酸化p38和MMP-7的表达
目的 探讨磷酸化信号蛋白p38(P-p38)和基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinases-7,MMP-7)在乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中的表达及相关性.方法 采用免疫组化SP法检测80例乳腺癌组织和20例癌旁正常乳腺组织中P-p38和MMP-7的表达,分析二者表达与临床病理参数的关系及相关性;采用Western blot法检测20例发生淋巴结转移的乳腺癌组织(转移组)、20例未发生淋巴结转移的乳腺癌组织(未转移组)及20例癌旁乳腺组织(对照组)中P-p38和MMP-7的表达.结果 免疫组化检测:P-p38和MMP-7在乳腺癌组织中的阳性率分别为57.50%和77.50%,明显高于癌旁乳腺组织(P<0.05).P-p38表达与乳腺癌的临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05).MMP-7表达与乳腺癌的组织学分级和淋巴结转移有关(P<0.05).Western blot法检测:P-p38和MMP-7在转移组中表达最高,在未转移组表达高于对照组.相关性分析显示,乳腺癌中P-p38和MMP-7表达呈正相关性(rs=0.324,P=0.004).结论 乳腺癌组织中存在P-p38过度活化和MMP-7高表达,二者呈正相关,提示P-p38和MMP-7在乳腺癌的发生、发展中起促进作用,二者可能存在某种协同关系.韩艳春,张骞,董孟华,刘鲁英 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据
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