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mTOR 信号通路在克唑替尼诱导的 EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株 H2228凋亡中的作用
目的:探讨以磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶蛋白家族成员哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mTOR)为中心的信号通路在克唑替尼( crizotinib)诱导的棘皮动物微管结合蛋白样蛋白4-间变性淋巴瘤激酶( EML4-ALK)融合基因阳性的非小细胞肺癌细胞株H2228凋亡中的作用。方法:根据不同的实验目的处理H2228细胞后,荧光定量PCR检测基因状态,MTT法检测细胞抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blotting 检测细胞mTOR信号通路中关键蛋白的表达及活化水平。结果: Crizotinib对H2228细胞有促凋亡作用,呈时间和剂量依赖性,且能使H2228细胞阻滞在G1期。在使用crizotinib处理的凋亡细胞株中发现mTOR活化水平降低,mTOR上、下游关键蛋白的活化水平都呈下降趋势,肺癌细胞株H2228中特殊表达的融合蛋白EML4-ALK变异体3表达量未受影响,但其活化形式p-ALK明显受到抑制。结论:初步证实mTOR信号通路在crizotinib诱导含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞H2228凋亡中有一定作用,为crizotinib的作用机制提供了依据。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
甲磺酸伊马替尼的合成工艺改进
目的:改进甲磺酸伊马替尼的合成工艺。方法以4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯甲酰氯二盐酸盐与4-甲基-N3-[4-(3-吡啶基)嘧啶-2-基]-1,3苯二胺为起始原料,进行水相缩合反应得到伊马替尼游离碱,再与甲磺酸成盐,两步反应合成新型酪氨酸酶抑制剂类抗肿瘤药物伊马替尼。结果优化后的工艺成本低廉、后处理简便、产品纯度高、收率高,并且对环境污染小。纯度可达99.7%,且单一杂质<0.1%。结论新工艺的总收率达81.5%,可工业化生产,前景广阔。目标产物结构经1 H NMR,ESI-MS得到结构确证。徐晓霞,闵涛,史为龙 - 药学实践杂志文章来源： 万方数据 -
吉非替尼通过增加Fox03a活性抑制肺纤维化小鼠上皮-间质转分化
目的:研究吉非替尼对肺纤维化小鼠转录因子叉头框蛋白03a(Fox03a)活性、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平及相关通路的影响,探讨吉非替尼抑制肺上皮-间质转分化的可能机制.方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为3组:对照组(生理盐水气管内雾化)、博来霉素组(博来霉素3mg/kg溶于100止生理盐水气管内雾化)和吉非替尼处理组(博来霉素气管内雾化后,每天吉非替尼20mg/kg溶于100μL生理盐水灌胃).实验第14天收集样本,将小鼠肺组织置于10%中性甲醛固定,石蜡包埋切片后行HE与Masson染色;RT-PCR法检测Fox03a和α-SMAmRNA表达水平;Westernblotting法检测表皮生长因子受体(EGFR)、Akt、Fox03a和仅-SMA蛋白表达水平.结果:吉非替尼处理组小鼠肺组织病理损伤较博来霉素组明显减轻,胶原沉积明显减少,炎症损伤评分及纤维化评分明显下降(均P〈0.01),Fox03amRNA表达水平明显升高(P〈0.05),α-SMAmRNA表达水平明显下降(P〈0.05),总Fox03a蛋白表达增加,但Fox03a磷酸化水平显著下降(P〈0.01),胞核Fox03a蛋白明显增加(P〈0.05);同时,EGFR和Akt磷酸化水平也显著下降(P〈0.01,P〈0.05),上皮.间质转分化标志蛋白α-SMA表达水平明显降低(P〈0.05).结论:吉非替尼抑制博来霉素诱导的肺纤维化,其机制可能与抑制EGFR/Akt通路活化、增强转录因子Fox03a活性、从而抑制上皮-间质转分化密切相关.彭婷,杜海坚,李理,李伟峰,黄文杰 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
c-M yc 抑制剂10058-F4对伊马替尼耐药细胞的增殖抑制作用
目的:探讨c-Myc小分子抑制剂10058-F4对慢性粒细胞白血病细胞K562及伊马替尼耐药的K562/G细胞的影响,为克服耐药提供新的治疗策略。方法: Western blotting 测定细胞中c-Myc蛋白表达水平,PI染色检测细胞周期。 MTT法及克隆形成实验测定K562及K562/G细胞的增殖情况,Annexin V-PI染色检测细胞凋亡。结果:MTT结果显示,耐药细胞K562/G与K562细胞相比,对伊马替尼的敏感性明显降低;Western blotting检测结果表明耐药细胞具有c-Myc蛋白高表达的特点。进一步MTT结果显示,与对照组相比,c-Myc小分子抑制剂10058-F4可抑制K562及K562/G细胞的增殖,并呈剂量及时间依赖性。重要的是, K562/G细胞比K562细胞对10058-F4敏感性更高。细胞周期检测显示,10058-F4可使K562及K562/G细胞周期阻滞于G0/G1期,表明抑制c-Myc导致的增殖抑制与细胞周期阻滞相关。 Annexin V-PI染色结果显示10058-F4可促进K562及K562/G细胞发生凋亡。克隆形成实验表明K562/G耐药细胞的克隆形成数目明显高于K562细胞。同时,与对照组相比,10058-F4可抑制细胞的克隆形成能力,并增强伊马替尼的毒性作用。结论:耐药细胞K562/G具有c-Myc高表达的细胞遗传学特点;10058-F4可抑制K562及K562/G细胞增殖,促进凋亡,并抑制细胞的克隆形成能力;c-Myc抑制剂10058-F4可逆转c-Myc高表达引起的耐药。龙梓洁,方志刚,潘晓娜,范蕊芳,林东军 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
替莫唑胺对胶质瘤侵袭性的影响及可能机制
目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在替莫唑胺(temozolomide,TMZ)降低胶质瘤侵袭性过程中的作用及机制.方法对数生长期的C6胶质瘤细胞随机分为TMZ处理10、30、60、120、180和240 min组,每组各15例,动态监测培养液中TNF-α的含量(放射免疫法)、C6细胞内p53蛋白的表达(Western blot法)和细胞凋亡水平(Annexin V-FITC法).制备体外胶质瘤的侵袭模型,利用结晶紫染色法检测胶质瘤的侵袭性.结果 TMZ作用于C6细胞后,培养液中TNF-α的含量明显增加,于120 min时含量最多(P<0.01),其后开始减少.C6细胞内p53蛋白的表达于处理后120 min达高峰(P<0.01),其后逐渐减少.TMZ作用于体外胶质瘤侵袭模型后,胶质瘤细胞的侵袭性降低.结论 TNF-α介导TMZ降低胶质瘤侵袭性,此作用可能是由于TMZ促进C6细胞释放TNF-α,增加的TNF-α又促进胶质瘤细胞凋亡所致.王健,贾永森,赵喜庆,秦丽娟 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
超抗原葡萄球菌肠毒素A拮抗伊马替尼抑制细胞活化作用的研究
目的:探讨葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)对甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate,IM)抑制T淋巴细胞活化的影响.方法:2mg/LSEA和50nmol/LIM联合作用于Jurkat细胞24h后,用实时荧光定量PCR技术检测CD3ε和ζ链mRNA表达水平变化;Westernblotting技术检测CD3ε和ζ链蛋白水平变化.结果:单纯IM组CD3e和链mRNA及蛋白表达均表现下调;SEA与IM联合用药组可以逆转IM下调CD3ε和ζ链mRNA及蛋白表达水平作用.SEA拮抗IM抑制作用中,对CD3e链mRNA表达上调的作用明显大于CD3ζ链.结论:SEA能拮抗IM对T细胞CD3ε和ζ链表达的抑制作用.颜宇辉,陈小华,王冠明,林晨,李扬秋 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
伊马替尼减轻DOCA诱导的大鼠心肌纤维化与PDGFs/PDGFRs信号通路有关
目的:探讨血小板源性生长因子(PDGFs)/PDGF受体(PDGFRs)信号通路拮抗剂伊马替尼(IMA)减轻醋酸去氧皮质酮(DOCA)诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化的作用机制及PDGFs/PDGFRs信号通路在其中的作用.方法:60只雄性SD大鼠行右肾切除术,术后予以1%氯化钠和0.1%氯化钾饮水4周并随机分成3组:对照组、实验组(DOCA组)和治疗组(DOCA+IMA组).使用尾套法每2周测定1次大鼠动脉收缩压(SBP),苦味酸-天狼星红染色观察大鼠心肌间质纤维化程度和心肌血管周围胶原面积(PVCA)/血管腔面积(VA)比值,实时荧光定量PCR法检测心肌组织成纤维细胞特异蛋白1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、前胶原蛋白Ⅰ(procollagen Ⅰ)、前胶原蛋白Ⅲ(procollagen Ⅲ)、PDGFRα和PDGFRβ的mRNA含量,免疫组化法观察心肌组织波形蛋白(vimentin)、α-SMA、PDGFRα、PDGFRβ及磷酸化的PDGFRβ(p-PDGFRβ)的蛋白表达,免疫荧光法定位PDGFRα和PDGFRβ表达的细胞类型.结果:(1)干预第14天和第28天血压测定结果显示DOCA及DOCA+IMA组大鼠的SBP均明显高于对照组(P<0 01),而DOCA组与DOCA+IMA组的SBP无显著差异(P>0.05).干预第28天,DOCA组心肌间质纤维化程度和PVCA/VA比值明显高于对照组(P<0 01),DOCA+IMA组心肌间质纤维化程度和PVCA/VA比值虽高于对照组(P<0.05),但较DOCA组显著减小(P<0 01).(2)干预第14天,DOCA组的PDGFRα和PDGFRβ表达较对照组增加(P<0 01),DOCA+IMA组的PDGFRα和PDGFRβ 表达较DOCA组减少(P<0 01).干预第28天,与对照组相比,DOCA组的PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ表达明显增加(P<0 01),而PDGFRα的表达未见明显增加,组内比较显示PDGFRβ 表达大于PDGFRα,DOCA+IMA组PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ 表达较DOCA组减少(P<0 01).(3) 干预第28天,对照组大鼠心脏间质主要是vimentin阳性的成纤维细胞,α-SMA表达很少,DOCA组大鼠α-SMA阳性的梭形细胞(肌成纤维细胞)数量明显增加(P<0 01),DOCA+IMA组较DOCA组肌成纤维细胞数量均减少(P<0.05).(4)在成纤维细胞和肌成纤维细胞中检测到的PDGFRα蛋白表达呈阳性,而在血管平滑肌细胞(VSMCs)中未检测到.PDGFRβ蛋白不仅在成纤维细胞和肌成纤维细胞中表达呈阳性,而且在VSMCs中也有表达.结论:在DOCA诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化中,PDGFRα主要在心肌纤维化早期发挥作用,而PDGFRβ在心肌纤维化的全程均起作用.PDGFRα和PDGFRβ表达定位于心脏成纤维细胞和肌成纤维细胞,伊马替尼能够减少肌成纤维细胞的数量,表明伊马替尼很可能通过抑制PDGFs/PDGFRs信号通路,减少成纤维细胞的增殖和转化生成肌成纤维细胞,从而减轻心肌纤维化.范彬,马礼坤,李谦,汪麟,周俊岭,吴佳纬 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
克霉唑联合氟康唑治疗复发性念珠菌性阴道炎的临床效果观察
目的观察临床应用克霉唑、氟康唑联合用药治疗复发性念珠菌性阴道炎的疗效.方法选择2009年2月至2010年11月收治的210例复发性念珠菌性阴道炎患者,并随机分为克霉唑组(A组)、氟康唑组(B组)和克霉唑、氟康唑联合治疗(c组)3组,每组各70例.A组患者给予克霉唑阴道片,每晚睡前阴道深部放药一粒,3d后再放1粒,连放2次;B组患者给予口服氟康唑,顿服,7d为1个治疗疗程;C组患者同时给予克霉唑和氟康唑两种药物.结果A组和B组患者均有一定的疗效,但是C组治疗效果更优于A、B两组且差异显著(P〈0.05).患者出院后回访治疗后的复发率,C组也明显低于A组和B组.3组中共有14例患者服药后出现腹泻,恶心及呕吐症状,不过症状较轻微,未采取给药措施2d后均自行痊愈.结论对于复发性念珠菌性阴道炎应用克霉唑、氟康唑联合治疗,不但疗效确切而且复发率低.李合莲,袁新德,陈奇峰,付剑,林奎,潘雯,钟玲,倪国才 - 临床和实验医学杂志文章来源： 万方数据 -
15.5%丙环·戊唑醇水乳剂的高效液相色谱法测定
采用反相高效液相色谱法对15.5%丙环·戊唑醇水乳剂中的丙环唑和戊唑醇进行同柱一次性分析和定量.结果表明,该方法中丙环唑和戊唑醇的线性相关系数分别为0.999 6和0.999 2,标准偏差分别为0.019和0.006,变异系数分别为0.13%和1.12%,平均回收率分别为99.82%和99.52%.李金萍 - 现代农药文章来源： 万方数据 -
HPLC法测定硝酸咪康唑栓中硝酸咪康唑的含量
目的 建立硝酸咪康唑栓的HPLC含量测定方法.方法 采用HPLC法,色谱条件:ODS柱(250 mm*4.6 mm,5 μm);甲醇-乙腈-5 g·L-1醋酸铵溶液(42.5∶42.5∶15)为流动相;流速1.0 mL·min-1;检测波长230 nm;进样量10 μL;柱温35 ℃.结果 硝酸咪康唑进样量在0.499~2.994 mg·mL-1范围内,其峰面积值与进样质量浓度有良好的线性关系,r=0.999 1,回收率为100.7%,RSD为1.0%(n=3).结论 经与紫外-可见分光光度法比较,该法重复性好,灵敏度高,结果准确,适用于硝酸咪康唑栓的含量测定.唐永红,宋愿智,李秋菲 - 西北药学杂志文章来源： 万方数据
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